梅毒实验检测检验科.pptVIP

Ⅰ期梅毒病人取硬下疳渗出液，Ⅱ期梅毒取梅毒疹渗出液或局部淋巴抽出液。对Ⅰ期梅毒末期以后（大约感染3—4周以后）的病人可分离血清检查有无梅毒螺旋体抗体和反应素。检验方法：1、?显微镜镜检渗出液涂片后可直接用暗视野显微镜检。直接镜检适合ⅠⅡ期梅毒的检查。（现已经不常用）2、?血清学试验包括非螺旋体抗体和密螺旋体抗体两类1）?非螺旋体抗体试验（NtrAT）用正常牛心肌脂质作为抗原，测定病人血清中的反应素。均为初筛试验。2）?密螺旋体抗体试验（TrAT）采用Nichols株梅毒螺旋体作为抗原，测定血清中梅毒螺旋体特异抗体，特异性强，可用作梅毒证实试验。送检标本和检验方法第5页,共30页，星期六，2024年，5月梅毒的治疗非口服途径的青霉素可用于各期梅毒的治疗早期梅毒的治疗首选240万单位苄星青霉素G单次肌肉注射。对青霉素过敏者，替代治疗方案有强力霉素（口服，100mg一次，每日2次，持续2周）或四环素（口服，500mg一次，每日4次，持续2周）早期隐性梅毒的治疗方案与早期梅毒相同。晚期隐性梅毒的首选治疗方案为每周一次肌肉注射240万单位苄星青霉素G，持续3周；对青霉素过敏者，替代治疗方案有强力霉素（口服，100mg一次，每日2次，持续4周）或四环素（口服，500mg一次，每日4次，持续4周）合并HIV感染者的治疗方案同晚期隐性梅毒梅毒瘤性梅毒和心血管梅毒的治疗方案与晚期隐性梅毒相同。神经梅毒的治疗只能采用青霉素，具体方案为静脉注射水溶性青霉素G（每4小时300万~400万单位，持续10~14天）或肌肉注射普鲁卡因青霉素G（240万单位一天，持续10~14天）同时口服丙磺舒（500mg一次，每日4次，持续10~14天）孕妇的治疗只能采用青霉素，青霉素过敏者需经脱敏后再进行治疗第6页,共30页，星期六，2024年，5月暗视野显微镜检查法：主要的梅毒病原学诊断方法。是最特异的一期梅毒检测方法。取材部位以硬下疳为主，亦可从宫颈、阴道、淋巴结等处取材。阳性可确诊，阴性不能排除梅毒（须在3周内不同的3天采样检测，才能得出阴性结果）。暗视野显微镜法诊断的准确性受操作者的经验、病灶中活螺旋体的数量及口腔、肛门破损处存在的非致病性螺旋体等因素影响镀银染色法：与暗视野检查法的临床意义基本相同。利用梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染成棕黑色，再通过普通高倍显微镜进行观察直接免疫荧光法（DFA)：是目前国外采用较多的方法，其特异性及敏感性均优于暗视野检查法。将特异性的抗梅毒螺旋体单克隆抗体用荧光素标记，如标本中存在梅毒螺旋体，则通过抗原抗体特异性结合，在荧光显微镜下可见到发苹果绿色的梅毒螺旋体。此法可区分梅毒螺旋体和其他非致病性或条件致病性螺旋体梅毒的病原学检测（一）第7页,共30页，星期六，2024年，5月聚合酶链反应（PCR）：PCR能对生殖器溃疡进行早期的鉴别诊断，区分梅毒、生殖器疱疹和软下疳。它又可分为PCR和RT-PCR。PCR的设计主要针对编码梅毒螺旋特异性抗原和TpN47的DNA开放编码区，常见的引物有K03A、K04、47-1、47-2、47-3、47-4等。由于在PCR中会偶然出现非特异的PCR产物而干扰结果，这就必须用特异性的DNA探针进行DNA-DNA杂交来提高PCR的特异性及敏感性。此外，由于TpN47的保守性，雅司螺旋体可产生类似的PCR产物，所以这种设计的PCR不能区分梅毒和雅司；但可以区分梅毒螺旋体和引博氏疏螺旋体，这就可以解决梅毒与莱姆病之间血清诊断中的免疫交叉问题。另一种是RT-PCR，常见的设计是针对梅毒螺旋体的16srRNA366bp片段，这种方法污染少，特异性敏感性高，但价格稍高。PCR在梅毒持续感染中的诊断价值目前尚无一致意见，理论上PCR可查出死亡的TP，所以治疗后PCR阳性并不意味着治疗失败，但死亡的TP从机体内清除较快（15～30天），而存活的TP从机体内清除至少需120天，所以治疗数周后PCR阳性意味着持续感染的可能。此外，也有将PCR用于产前诊断和神经梅毒诊断的报道梅毒的病原学检测（二）第8页,共30页，星期六，2024年，5月人类对梅毒无先天免疫性，尚无疫苗接种进行人工免疫，仅能在受感染后产生感染性免疫。已完全治愈的早期梅毒患者仍可以再感染感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗3～9个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病人IgM可转阴性，再感染时又出现阳性，故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出梅毒的免疫性（一）第9页,