培养基的认识及选择.ppt

培养基的认识及选择培养基的成分营养物质：水、蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇类、血液、无机盐、鸡蛋、动物血清、生长因子（Vit、aa、嘌呤、嘧啶等）。氮源氮源和碳源无糖碳源和能源氯化钠：维持酶的活性、调节菌体内外渗透压磷酸盐：缓冲作用培养基的成分凝固物质：最常用的为琼脂(agar)，它是从石花菜中提出来的一种半乳糖胶，100℃溶解，40℃凝固，可利用琼脂来改变培养基的物理性状(固体或半固体)，它是理想的固体培养基的赋形剂，其本身不被细菌分解利用，也无营养作用。常用的指示剂有：酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国兰等酸碱指示剂，美兰为常用的氧化还原指示剂。抑菌剂和指示剂：不是细菌生长繁殖的必需物质，是制备细菌的选择、鉴别培养基和判断结果的需要。常用的抑菌剂有：胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。培养基的成分液体培养基：牛肉汤(牛肉浸液+1%蛋白胨+0.5%NaClpH7.4)半固体培养基：液体培养基+0.2~0.5%agar固体培养基：液体营养物+2%agar按物理性状培养基的分类基础培养基：是其他培养基的基础，如普通肉汤、普通琼脂平板、斜面、高层营养培养基：BAP、罗—琴培养基、吕氏血清斜面选择培养基：SS平板、BS平板、Mac平板等鉴别培养基：糖发酵管、MIU、KIA、TSI等特殊培养基：厌氧培养基、高渗培养基等按用途培养基的分类01血琼脂平板02巧克力平板03淋球菌平板04念珠菌显色平板05MAC平板06SS平板07EMB平板08TCBS平板09M-H平板10M-H血平板11转运培养基常用的培养基血琼脂平板适用于各类细菌生长观察细菌菌落形态判断溶血情况α-溶血环：菌落周围呈绿色，红细胞不完全溶解β-溶血环：菌落周围的培养基内红细胞完全被破坏γ溶血：不溶血03大多数革兰阴性菌都会生长02添加万古霉素抑制革兰阳性菌，但有时α-溶血的链球菌会形成草绿色溶血环01主要用于嗜血杆菌的分离：含有Ⅴ、Ⅹ因子巧克力平板010203用于分离淋病奈瑟菌加入万古霉素和多粘菌素B溶液抑制革兰阳性菌和真菌生长淋球菌平板01分离酵母样真菌02鉴别培养基：不同的真菌显示出不同颜色的菌落念珠菌显色平板选择性培养基：供肠道致病菌分离培养非发酵菌鉴别抑制剂——胆盐：抑制革兰阳性菌指示剂——中性红：区分分解乳糖和不分解乳糖的细菌肠道致病菌不分解乳糖，非致病菌分解乳糖01030204MAC平板01强选择性培养基：用于志贺菌和沙门菌的分离02抑制剂——枸橼酸钠、胆盐、硫代硫酸钠协同作用与煌绿共同抑制肠道非病原菌及大部分大肠埃希菌。其中胆盐还能抑制革兰阳性菌。03指示剂——中性红04沙门菌菌落特点：无色半透明，产H2S与培养基内三价铁离子反应呈黑色中心。05志贺菌菌落特点：无色不透明或透明，边缘整齐SS平板010203040506弱选择性培养基抑制革兰阳性菌伊红和美蓝两种染料一酸一碱作为指示剂细菌分解乳糖时产酸，使伊红美蓝结合成紫红色化合物，有时呈金属光泽不分解乳糖的细菌菌落为无色或灰白色有的细菌产碱过多而出现蓝色菌落EMB平板TCBS平板

硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基霍乱弧菌和副溶血弧菌分离培养1碱性琼脂2胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群3氯化钠可刺激弧菌的生长4以麝香草酚兰和溴麝香草酚兰为指示剂5霍乱弧菌分解蔗糖产酸，菌落呈黄色半透明，圆形扁平，带有黏性不易挑起6副溶血弧菌不分解蔗糖，菌落呈蓝绿色半透明，大而扁平，带有黏性701H平板02水解酪蛋白琼脂03用于细菌药敏试验琼脂扩散法（K-B法）04胸腺嘧啶核苷酸含量低，不干扰磺胺类药物测定05控制钙、镁离子浓度，不干扰氨基糖苷类药物测定M-H琼脂中加入5%脱纤维羊血01用于链球菌药敏试验02M-H血平板拭子Cary-Blair运送培养基：弯曲菌、沙门菌、志贺菌的标本采集和保存缓冲甘油盐水保存液：粪便标本保存改良Cary-Blair运送培养基：厌氧菌标本阿米斯转运培养基：支原体培养转运培养基01020304大便培养标本：EMB、SS、MAC、TCBS酵母样真菌培养标本：念珠菌显色平板淋球菌培养标本：淋球菌平板大部分细菌培养标本：血平板、巧克力平板05中段尿标本：血平板培养基的选择