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子曰:“知者不惑，仁者不忧，勇者不惧。”——《论语》

CHO细胞无血清培养基的筛选与优化

在生物制药领域，CHO细胞（ChineseHamsterOvaryCell，中国仓

鼠卵巢细胞）因其能够高效表达重组蛋白而被广泛应用。然而，传统

的含血清培养基存在诸多问题，如血清成分复杂且批次间差异大，易

引入外源病毒和支原体污染等。因此，开发和优化CHO细胞无血清培

养基成为了提高生物制品质量和安全性的关键环节。

一、CHO细胞无血清培养基的重要性

血清在细胞培养中曾被广泛使用，但其存在的问题不容忽视。血清

中的成分复杂且不稳定，这使得细胞培养过程难以控制和标准化。不

同批次的血清质量差异较大，可能影响细胞的生长、代谢和产物表达。

此外，血清中可能携带的病毒、支原体等污染物会给生物制品带来潜

在的安全风险。

相比之下，无血清培养基具有明显的优势。它的成分明确且稳定，

便于质量控制和优化。无血清培养基可以减少外源污染物的引入，提

高生物制品的安全性。同时，它能够为细胞提供更适宜的生长环境，

促进细胞的生长和产物表达，从而提高生产效率和产品质量。

二、筛选CHO细胞无血清培养基的方法

1、基础培养基的选择

子曰:“知者不惑，仁者不忧，勇者不惧。”——《论语》

首先需要选择合适的基础培养基作为起点。常见的基础培养基如

DMEM（DulbeccosModifiedEagleMedium，杜氏改良伊格尔培养基）、

RPMI1640等，它们在营养成分和离子浓度等方面有所不同。需要根

据CHO细胞的特性和培养需求，初步筛选出几种可能适用的基础培养

基。

2、添加剂的筛选

在基础培养基的基础上，需要添加各种营养成分、生长因子、激素

等添加剂来满足CHO细胞的生长和代谢需求。例如，胰岛素、转铁蛋

白、乙醇胺等对于细胞的生长和存活至关重要。通过单独或组合添加

这些添加剂，并检测细胞的生长情况、代谢指标和产物表达水平，来

筛选出最优的添加剂组合。

3、化学成分的优化

除了添加剂，培养基中的化学成分如氨基酸、维生素、无机盐等的

浓度和比例也需要进行优化。可以采用单因素实验或响应面分析法等

方法，研究不同化学成分对细胞生长和产物表达的影响，从而确定最

佳的化学成分组成。

4、高通量筛选技术的应用

随着技术的发展，高通量筛选技术在培养基筛选中发挥了重要作用。

例如，微流控芯片技术可以在微小的空间内同时进行多个培养基配方

的筛选，大大提高了筛选效率。此外，自动化细胞培养和检测系统能

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够快速、准确地获取大量的细胞生长和代谢数据，为培养基的筛选提

供有力支持。

三、优化CHO细胞无血清培养基的策略

1、细胞代谢分析

通过对细胞代谢过程的分析，了解细胞在不同培养条件下对营养物

质的摄取和代谢产物的生成情况。例如，检测葡萄糖、谷氨酰胺的消

耗速率以及乳酸、氨等代谢产物的积累情况。根据代谢分析的结果，

可以针对性地调整培养基的成分和浓度，优化细胞的代谢环境，提高

细胞的生长和产物表达效率。

2、培养条件的优化

除了培养基成分，培养条件如温度、pH值、溶氧水平等也会影响

细胞的生长和产物表达。需要对这些培养条件进行优化，以配合无血

清培养基的使用。例如，适当降低培养温度可以减少细胞的代谢负担，

提高细胞的存活率和