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毕业设计（论文）

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白花丹水煎液对四氯化碳慢性肝损伤小鼠肝组织脂质过氧化的影响

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白花丹水煎液对四氯化碳慢性肝损伤小鼠肝组织脂质过氧化的影响

摘要：白花丹水煎液作为一种传统的中药成分，具有广泛的药理活性。本研究旨在探讨白花丹水煎液对四氯化碳慢性肝损伤小鼠肝组织脂质过氧化的影响。通过建立四氯化碳慢性肝损伤小鼠模型，观察白花丹水煎液对小鼠肝组织脂质过氧化的影响，并对其作用机制进行初步探讨。结果表明，白花丹水煎液能够显著降低肝组织中丙二醛（MDA）含量，提高超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性，表明其具有抗氧化作用。本研究为白花丹水煎液在肝脏疾病治疗中的应用提供了实验依据。

肝脏是人体重要的代谢和解毒器官，其功能异常会导致多种疾病的发生。四氯化碳（CCl4）是一种常见的肝毒性物质，长期暴露于四氯化碳可导致肝损伤。近年来，随着环境污染和生活方式的改变，肝脏疾病的发生率逐年上升。因此，寻找有效的肝脏保护剂对于预防和治疗肝脏疾病具有重要意义。白花丹（Plumbagozeylanica）是一种传统中药，具有清热解毒、活血化瘀等功效。本研究旨在探讨白花丹水煎液对四氯化碳慢性肝损伤小鼠肝组织脂质过氧化的影响，为白花丹在肝脏疾病治疗中的应用提供实验依据。

一、1.材料与方法

1.1实验动物与分组

(1)实验动物选用健康雄性昆明种小鼠，体重在20-22g之间，由我国某大学动物实验中心提供。所有实验动物在适应性饲养1周后，随机分为四组，分别为正常对照组、模型组、白花丹低剂量组、白花丹高剂量组。每组动物数量均为10只，以保证实验结果的可靠性。正常对照组给予等体积的生理盐水，模型组和白花丹处理组给予四氯化碳溶液进行慢性肝损伤诱导。

(2)在实验过程中，模型组小鼠通过灌胃四氯化碳溶液（4mg/mL，每周两次）建立慢性肝损伤模型。白花丹低剂量组和小剂量组分别给予白花丹水煎液（0.5g/kg和1.0g/kg，每日两次）进行干预，正常对照组和模型组给予等体积的生理盐水。实验期间，对各组小鼠进行密切观察，记录小鼠的体重变化、行为表现等。

(3)实验结束后，对各组小鼠进行肝脏组织取样，并进行肝组织病理学观察。肝脏组织样本经固定、脱水、透明、包埋、切片后，使用HE染色和油红O染色进行观察。通过光学显微镜观察肝组织形态学变化，包括肝细胞肿胀、脂肪变性、炎症细胞浸润等。同时，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肝组织中的丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，以评估白花丹水煎液对肝组织脂质过氧化的影响。实验数据采用SPSS22.0软件进行统计分析，组间比较采用单因素方差分析（One-wayANOVA），以P0.05为差异具有统计学意义。

1.2药物制备

(1)白花丹水煎液的制备：首先，将白花丹药材（购自我国某知名药材市场）清洗干净，干燥后粉碎成粗粉。称取一定量的白花丹粗粉，按照1:10的比例加入蒸馏水，浸泡30分钟后，进行煎煮。煎煮过程中，保持水温在100℃左右，煎煮时间为1小时。煎煮结束后，将煎液过滤，得到初煎液。对初煎液进行再次煎煮，方法同上。将两次煎煮得到的煎液合并，浓缩至一定体积，然后加入适量的无水乙醇，进行醇沉处理。静置过夜后，取上清液，于60℃条件下进行减压干燥，得到白花丹干燥浸膏。

(2)白花丹干燥浸膏的复溶于生理盐水：将得到的白花丹干燥浸膏，按照0.5g/kg和1.0g/kg的剂量，分别复溶于生理盐水中，配制成不同浓度的白花丹水煎液。为了确保药物浓度的准确性，使用电子分析天平进行称量，并使用移液器进行精确移液。在制备过程中，严格遵循无菌操作规程，避免药物污染。

(3)药物稳定性实验：为评估白花丹水煎液的稳定性，将制备好的白花丹水煎液分别置于4℃和室温条件下，每隔一定时间取样，检测其有效成分含量。结果表明，在4℃条件下，白花丹水煎液的有效成分含量在3天内基本稳定；在室温条件下，有效成分含量在24小时内保持稳定。因此，白花丹水煎液在4℃条件下储存，室温下短期使用，可保证其有效成分的稳定性。

1.3模型建立与分组

(1)实验动物分组：本实验选用健康雄性昆明种小鼠，体重在20-22g之间，共40只。动物购自我国某大学动物实验中心，饲养于温度（22±2）℃、湿度（55±5）%的动物实验室内，适应性饲养1周后进行实验。随机将小鼠分为四组，每组10只，分别为正常对照组、模型组、白花丹低剂量组、白花丹高剂量组。

(2)模型建立：模型组小鼠采用四氯化碳（CCl4）慢性肝损伤模型建立方法。首先，将CCl4用橄榄油溶解