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“升级版”杂交瘤筛选平台
-如何加速抗体药物发现
任为
抗体开发首席科学家
北京义翘神州科技股份有限公司
CONTENTS
01杂交瘤技术平台及限制因素02杂交瘤测序问题分析和优化
03主克隆提基因优势和案例04公司介绍
杂交瘤技术平台及限制因素
杂交瘤抗体开发技术
技术路线成熟，成本优势；
Splenocytes电融合技术大幅提升融合效率；
Hybridomacells上清介入多功能筛选，提高成功率；
Myeloma自主开发鼠单抗数量26000种
700+技术服务项目经验
Amplification
purification
Screening
4
杂交瘤案例——IHC诊断原料抗体开发
操作流程：
阳性组织（部分数据展示）
多肽免疫5只小鼠，免疫血清进行ELISA效价检测和IHC
筛选（2个阳性组织、1个阴性组织）
挑选ELISA及IHC均合格的1只小鼠融合
小肠（20×）十二指肠（20×）结肠（20×）
主克隆阶段，ELISAIHC（双组织）
200株结合阳性，首批73株IHC检测；阴性组织（部分数据展示）
挑选12株合格主克隆细胞进行亚克隆筛选。
2~3次有限稀释，ELISAIHC（多组织）
获得11株ELISA与IHC合格抗体；
挑选最优的6株克隆放大生产及抗体纯化。
平滑肌（20×）前列腺癌（20×）平滑肌瘤（20×）
抗体质控
1株抗体IHC多组织验证阳性，可作为诊断原料；抗体经多种组织检测合格
3株抗体满足科研试剂要求。
5
杂交瘤案例——IL15中和抗体开发
重组蛋白（细胞生物活性检测EC2~8ng/mL）
50
Balb/c、C57BL/6小鼠各免疫5只
10只小鼠高效价，挑选1只进行融合
活性蛋白免疫
融合后细胞接种42块96孔细胞培养板
835孔主克隆ELISA结合阳性
10
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