伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型三重荧光PCR检测方法.pdfVIP

ICS11.220

CCSB41

团体标准

T/CVMAxxx—xxxx

伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒

2型三重荧光RT-PCR检测方法

TriplexrealtimeRT-PCRdetectionmethodforporcinepseudorabiesvirus、

porcineparvovirusandporcinecircovirustype2

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国兽医协会发布

T/CVMAxxx—xxxx

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国海关科学技术研究中心提出。

本文件由中国兽医协会归口。

本文件起草单位：

本文件起草人：

I

T/CVMAxxx—xxxx

伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型三重荧光PCR检测方法

1范围

本文件规定了伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型三重荧光RT-PCR检测方法操作规程。

本文件适用于伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型的鉴别诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

PRV：伪狂犬病毒（PorcinePseudorabiesVirus）

PPV：猪细小病毒（PorcineParvovirus）

PCV-2：猪圆环病毒2型（PorcineCircovirustype2）

FAM：6-羧基荧光素(6-Carboxyfluorescein)

Cy5：荧光发光基团

Hex：六氯-6-甲基荧光素（6-Hexachlorofluorescein）

BHQ：荧光淬灭基团

5仪器和设备

多通道荧光PCR仪、生物安全柜、冰箱（2℃~6℃和-20℃）、台式冷冻离心机、组织匀浆机、漩

涡器、移液器及吸头（至少包括10μL、200μL和1000μL三个量程）。

6试剂和耗材

1

T/CVMAxxx—xxxx

6.1试剂

6.1.1病毒总核酸提取试剂TIANampVirusDNA/RNAKit或者其他等效核酸提取试剂。

6.1.2IQPowermixPCRkit或者其他等效多重荧光PCR试剂。

6.1.3无水乙醇（分析纯）和75%乙醇（用新开启的分析纯无水乙醇和DEPC处理水配制）及实验用

水按照G