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军团菌微生物学检查标本（痰、支气管分泌物、血液、）涂片染色镜检（Giemsa染色）分离培养（BEYE琼脂）鉴定试验结果报告形态染色菌落特征氧化酶、触酶荧光抗体染色等血清学试验检测指标：检测患者血清中特异性抗体方法：ELISA意义：检测特异性IgM：诊断军团菌病检测特异性IgG：军团菌病流行病学调查军团菌布鲁菌属引起布鲁菌病（波状热）可引起人畜共患病我国流行菌种主要是羊、牛、猪布鲁菌，以羊布鲁菌最常见属细胞被寄生菌形态染色革兰阴性球杆菌光滑型有微荚膜，无芽孢，无鞭毛常用染色法：改良Ziehl-Neelsen染色法：菌体红色，背景为蓝色柯兹洛夫斯基染色法：菌体红色，背景绿色布鲁菌属布鲁菌纯属培养物革兰染色培养特性专性需氧、5％～10％CO2营养要求高，常用肝浸液培养基生长缓慢菌落细小、无色透明、光滑布鲁菌属生化反应氧化酶、触酶：＋氧化分解葡萄糖脲酶试验＋产生硫化氢布鲁菌属血清学试验抗原构造菌种M抗原：A抗原羊布鲁菌20：1牛布鲁菌1：20猪布鲁菌1：2布鲁菌属临床意义1．致病物质：内毒素、透明质酸酶和过氧化氢酶2，传播途径：皮肤、呼吸道、消化道3．羊、牛和猪布鲁菌对人有较强的致病作用，尤以羊布鲁菌毒力最强。4．布鲁菌进入人体后，被中性粒细胞和巨噬细胞吞噬，成为胞内寄生菌，故以细胞免疫为主，但特异性IgM和IgG可发挥免疫调节作用。布鲁菌属临床治疗首选多西环素（强力霉素）；次选磺胺增强剂（TMP/SMZ）。由于病程长，布鲁菌病的治疗需要长期联合应用抗生素，用药时间需4~6周。微生物学检查1、标本可采集患者血液、骨髓、羊水、尿或流产胎儿的淋巴、肝、脾、肺组织、流产病畜的子宫分泌物等标本进行检查。2、鉴定（1）直接显微镜检查（2）荧光抗体染色检查（敏感性高）（3）分离培养（4）生化试验（5）抗体检查布鲁菌属布鲁菌属主要菌种鉴别要点触酶氧化酶葡萄糖半乳糖阿拉伯糖精氨酸脱羧酶硝酸盐还原脲酶硫化氢产生硫堇耐受复红耐受羊布鲁菌+++---+v-++牛布鲁菌+++++-+++-+猪布鲁菌++++++++(-)+-森林鼠布鲁菌+-+++-+++--绵羊布鲁菌+----------犬布鲁菌+++--+++-+-注：+，阳性；-，阴性；v，不定；（-），大部分菌株阴性布鲁菌属医学技术系微免教研室其他革兰阴性苛养菌临床微生物检验技术网络资源共享课程1掌握嗜血杆菌属和弯曲菌属生物学特性熟悉鲍特菌属、军团菌属、布鲁菌属生物学特性23熟悉嗜血杆菌属微生物检验，了解其他菌属微生物学检验4熟悉上述菌属的致病性学习目标其他革兰阴性苛养菌嗜血杆菌属鲍特菌属军团菌属布鲁菌属弯曲菌属幽门螺杆菌一、流感嗜血杆菌G-小杆菌，多形性有毒菌株形成荚膜流感嗜血杆菌（脑脊液）革兰染色流感嗜血杆菌纯培养物革兰染色流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌纯培养后革兰染色革兰染色阴性短小杆菌，呈球形，短丝状或多形态大小为（0.2～0.3）×（0.5～2.0）微米。流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌培养基中需加入血液，以提供X因子和V因子X因子－－高铁血红素：是细菌合成过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素氧化酶的的辅基。V因子－－辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD），是脱氢酶的辅酶，起递氢作用。菌落光滑、无色透明、露滴状CO2培养“卫星现象”卫星现象：流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时，由于后者能合成较多的V因子，在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大，离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。卫星现象流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆