医学分子生物学基础及技术职业教育医学生物技术专业教学聊城董岩岩60讲解.ppt

*所需主要成分：mRNA（单顺反子、甲基化帽子和PolyA尾巴）、80S核糖体、活化的起始氨酰-tRNA、翻译起始因子、GTP和Mg2+*真核与原核起始的区别？*真核生物核糖体没有E位，，转位时空载tRNA直接从P位脱落。*聊城职业技术学院董岩岩医学分子生物学基础及技术职业教育医学生物技术专业教学资源库蛋白质的生物合成1.mRNA和遗传密码2.tRNA的结构、功能与种类3.核糖体的结构与功能4.参与合成的酶及蛋白质因子5.原核生物多肽链合成的机理6.真核生物多肽链合成的机理7.翻译后的加工和定向运输本章概要其机理与原核细胞蛋白质生物合成相似，但也有很多差别：第六节真核细胞中蛋白质的生物合成原核生物真核生物mRNA一条mRNA编码几种蛋白质（多顺反子）一条mRNA编码一种蛋白质（单顺反子）转录后很少加工转录后进行首尾修饰及剪接转录、翻译和mRNA的降解可同时发生mRNA在核内合成，加工后进入胞液，再作为模板指导翻译核蛋白体30S小亚基＋50S大亚基?70S核蛋白体40S小亚基＋60S大亚基?80S核蛋白体起始阶段起始氨基酰-tRNA为fMet-tRNAifMet起始氨基酰-tRNA为Met-tRNAiMet核蛋白体小亚基先与mRNA结合,再与fMet-tRNAifMet结合核蛋白体小亚基先与Met-tRNAiMet结合，再与mRNA结合mRNA中的SD序列与16SrRNA3?-端的一段序列结合mRNA中的帽子结构与帽子结合蛋白复合物结合有3种IF参与起始复合物的形成有至少10种eIF参与起始复合物的形成延长阶段延长因子为EF-Tu、EF-Ts和EF-G延长因子为eEF-1α、eEF-1βγ和eEF-2终止阶段释放因子为RF-1、RF-2和RF-3释放因子为eRF真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。形成小亚基复合物的顺序不同于原核的：先形成40S-Met-tRNAimet-GTP三元复合物，然后再加入mRNA，这是真核与原核最大的差别。1.起始①核糖体分成40S和60S两个亚基（起始因子参与）。②43S前起始复合物的形成（40S·Met-tRNAMet·eIF2·GTP）。③mRNA复合物连接到43S前起始复合物上，形成48S前起始复合物。沿着mRNA向3’端方向扫描，定位起始密码子。eIF4F对5’帽子的准确识别及对GCC(A/G)CCAUGG的扫描起着重要的作用。④60S亚基与48S前起始复合物结合形成80S起始复合物。一、真核生物多肽链合成的过程43S前起始复合物48S起始复合物80S起始复合物43S核糖体复合物43S前起始复合物48S起始复合物三元复合物2.延长（进位、转肽和移位）与原核相似，区别在于延伸因子（eEF）体系不同。eEF-1：至少αβγδ四个亚基，eEF-1α与GTP结合，结合氨基酰-tRNA（延伸tRNA）进入核糖体A位与mRNA结合eEF-2：依赖于GTP水解的移位酶,使肽基-tRNA从核糖体的A位向P位移动eEF-3：参与维持翻译的准确性每个将要进位的氨酰tRNA被eEF-1α-GTP复合物带到核糖体上。当正确的氨酰tRNA进入A位置的时候，GTP水解，并且eEF-1α-GDP复合物分离。真核生物的转肽作用与原核生物类似，移位过程被eEF-2催化，同时伴随GTP水解，伴随着移位过程eEF-2从核糖体被释放，循环再次开始。3.终止终止释放因子为eRF，它可以识别三个终止密码子UAG，UAA和UGA。eRF连同GTP结合到核糖体的A位置，刺激肽基转移酶活性变为转移肽酰基到水分子（水解），而不是氨酰tRNA，此时合成终止。80S复合物分离成为40S和60S亚基，准备下一个翻译过程。真核生物蛋白质的合成过程原核生物和真核生物蛋白质合成起始异同点分析内容原核生物真核生物核糖体完整70S80S亚基50S，30S60S，40S起始氨酰tRNAfMet-tRNAifMetMet-tRNAiMet起始因子3种至少10种起始复合物的生成顺序1）30S?mRNA1)40S?Met-tRNAiMet2）30S?mRNA?fMet-tRNAifMet2)40S?Met-tRNAiMet?mRNA3）70S?mRNA?fMet-tRNAifMet3）80S?mRNA?Met-tRNAi