生物芯片与高通量筛选技术.ppt

第21页，共42页，星期日，2025年，2月5日蛋白质芯片应用第22页，共42页，星期日，2025年，2月5日蛋白质芯片应用疾病诊断和疗效判定研究蛋白质的相互作用发现药物或毒物作用靶位和作用机制第23页，共42页，星期日，2025年，2月5日发展日开发出廉价蛋白质芯片：开发成功可迅速检测癌症等疾病的廉价蛋白质芯片。把目前数十万日元一个的蛋白质芯片价格降到了仅为几千日元。预计这种芯片在4年内可以使用。光学蛋白质芯片是一种基于椭圆偏振光原理，利用抗原和抗体以及受体与配体特异性的结合，将分子间的相互作用转换为可直接读取的灰度值，对检测样品进行定量检测的方法。它由于无须对探针分子进行标记，因此有利于对蛋白质进行活性分析。应用后冠心病检测加速。第24页，共42页，星期日，2025年，2月5日发展中国科学家研制的丙型肝炎蛋白质芯片获国家药监局颁发的生物制品一类新药证书。这不仅是我国的第一个获新药证书的硅基材料蛋白质芯片，也是迄今为止世界上惟一得到政府药品监督管理机构颁发新药证书的蛋白质芯片。两英寸大小的蛋白质芯片已由深圳益生堂生物企业有限公司投产。只需要２微升（一滴血的十分之一）血清或血浆，１小时后就能检测出结果。而每次的检测费用只有１００元左右。第25页，共42页，星期日，2025年，2月5日细胞芯片新型的细胞芯片,其原理是应用细胞膜表面不同的抗原物质,与结合在玻片上的不同抗体发生特异性结合,通过自动捕获能力将所获细胞固定在特定区域,以此对淋巴瘤细胞进行诊断和分类。细胞芯片的制作:每种抗体与pH10－12的Tris2HCl缓冲液等体积稀释,通过生物芯片点样仪自动点样,将8种抗体分别点在醛基玻片上的各自区域,每一抗体点4个点,直径约2mm左右,形成4×8微阵列。点样后迅速将玻片置于湿盒中,4℃冰箱水化,过夜。第26页，共42页，星期日，2025年，2月5日细胞芯片应用疾病诊断胸腔液中淋巴瘤细胞检测第27页，共42页，星期日，2025年，2月5日发展最近出现了一种细胞微阵列芯片，他是将不同的质粒DNA点在玻璃片上做成质粒DNA芯片，接着在脂质转染试剂处理好的芯片上培养细胞，被转染的细胞因此获得了外源DNA赋予的新性状，因此也称为反向转染(reversetransfection).这种技术不但可以用于cDNA、融合肽或RNA分子的分析，而且还可以用于研究一些细胞因子、化学抑制剂或放射性标记对基因表达的影响.第28页，共42页，星期日，2025年，2月5日组织芯片Kononen等(1998)年在《自然》杂志上首次报道了组织芯片这一高通量的技术。组织芯片技术可以将数十个甚至上千个不同个体的临床组织标本按预先设计的顺序排列在一张玻片进行分析研究，是一种高通量、多样本的分析工具。它使科研人员第一次有可能同时对几百甚至上千种正常或疾病以及疾病发展不同阶段的自然病理生理状态下的组织样本，进行某一个或多个特定的基因，或与其相关的表达产物的研究。第29页，共42页，星期日，2025年，2月5日应用如Kononen等使用标准免疫组化方法利用组织芯片技术研究了645例各种乳腺癌组织标本，试验数据与传统病理切片相应研究结果完全一致；同时他们还发现有关p53等6种基因的检测结果表明，新鲜与石蜡包埋的组织标本的检测结果没有差异。Hedenfalk等结合组织芯片技术和基因芯片技术检测了原发性乳腺癌及组织标本。Hoos等用组织芯片技术对59例成纤维细胞瘤进行免疫表型分析。Mucci等用组织芯片证实了神经内分泌因素与前列腺癌进展的关系。第30页，共42页，星期日，2025年，2月5日第1页，共42页，星期日，2025年，2月5日主要内容生物芯片 基因芯片（DNA芯片） 蛋白质芯片（ProteinChips） 细胞芯片 组织芯片高通量筛选第2页，共42页，星期日，2025年，2月5日生物芯片生物芯片(biochip)是指采用微量点样等方式,将核酸片段、多肽分子、组织切片和细胞等生物样品有序地固定于支持物(如玻片、硅片、尼龙膜等载体)的表面,组成密集二维阵列,然后与已标记的待测生物样品中的靶分子进行杂交、或用免疫组织化学、原位杂交等技术使待检分子可视化,最后通过特定的仪器如激光共聚焦扫描仪或电荷偶联摄影像机(CCD)对可视化信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析,从而判断样品中靶分子的相对数量。由于常用玻片/硅片作为固相支持物,且在制备过程模拟计算机芯片的制备技术,所以称之为生物芯片技术。第3页，共42页，星期日，2025年，2月5日生物芯片根据芯片上固定的生物物质的不同,生物芯片分为基因芯片(Gene