有菌部位临床标本中细菌的检验岳阳王华洪讲解.pptx

有菌部位临床标本中细菌的检验;尿液（泌尿生殖道）标本的细菌学检验

（一）标本的采集

1.中段尿采集法

2.导尿法

3.膀胱穿刺采集法

4.集尿法

5.标本的运送和保存

?立即送检、及时接种

?室温不超过2小时，4℃不超过8小时

?淋病奈瑟菌感染尿液标本不能冷藏;（二）微生物学检验

1.常见病原菌;2.检验程序;3.检验方法

（1）涂片检查

?普通细菌检查：取沉淀涂片、染色、镜检

?淋病奈瑟菌检查;?念珠菌检查

?结核分枝杆菌检查：应与耻垢分枝杆菌相鉴别

?钩端螺旋体检查：暗视野显微镜下，发现一串细密亮珠、两端呈钩状且沿纵轴旋转运动的螺旋体时，报告找到螺旋体;（2）尿液细菌计数

?计算：cfu/ml=菌落数×稀释倍数

或cfu/ml=

?意义

革兰阳性球菌大于104cfu/ml,革兰阴性杆菌大于105cfu/ml，应考虑为泌尿系统感染;淋球菌菌落;4.结果报告

?初级报告：标本涂片染色镜检结果，如“找到革兰阴性双球菌，存在于细胞内（外），形似淋病奈瑟菌”

?最终报告：报告细菌种属、菌落计数、药物敏感性试验、结果评价及建议

?阴性报告：48小时无细菌生长者，报告“48小时培养无细菌生长”;（三）临床意义

?尿液中细菌数少于104cfu／ml或104～105cfu/ml之间，反复多次查出同一细菌时，一般也认为是病原菌。

?同份尿液中检出三种或以上不同微生物，应认为标本采集或处理不当被污染。

?尿液细菌学检查结果，应结合临床考虑综合;直肠肛拭子;（二）微生物学检验

1.常见病原菌;2.检验程序;3.检验方法

（1）涂片检查

?霍乱弧菌检查：

①动力检查：动力及制动试验

②染色镜检：革兰染色，发现鱼群状排列的革兰阴性弧菌，可做出初步报告

?酵母样菌检查;葡萄球菌;沙门菌;五种致病性大肠埃希菌

ETEC----肠产毒大肠埃希菌

EPEC----肠致病大肠埃希菌

EIEC----肠侵袭大肠埃希菌

EHEC----肠出血大肠埃希菌

EaggEC—肠凝聚性大肠埃希菌;?霍乱弧菌培养

米泔水样粪便→碱性蛋白胨水增菌→碱性琼脂平板或TCBS平板→35℃需氧培养→可疑菌落→形态检查、动力及制动试验、血清??试验鉴定

?副溶血性弧菌培养

粪便、可疑食物、呕吐物→3.5%NaCl蛋白胨水增菌→SS平板、TCBS平板→35℃需氧培养→可疑菌落→生化试验及耐盐试验鉴定;?金黄色葡萄球菌培养

粪便、肛拭子、可疑食物→甘露醇高盐琼脂平板、血琼脂平板→35℃需氧培养→可疑菌落→革兰染色、凝固酶、DNA酶及甘露醇发酵鉴定

?小肠结肠耶尔森菌培养

标本→NYE、1/15M磷酸盐増菌液→4℃、25～30℃、35℃、需氧环境→可疑菌落→生化反应、血清学试验鉴定;?空肠弯曲菌培养

标本→Camp-BAP、Skirrow或Butzler血琼脂→43℃、微需氧环境→有色半透明菌落→动力、生化试验鉴定。

?艰难梭菌培养

标本→CCFA平板→35℃、厌氧环境→可疑菌落→生化鉴定、毒素试验;?真菌培养

标本→沙保弱琼脂平板、血琼脂平板→25℃及37℃培养→可疑菌落→镜检、芽管及厚膜孢子试验等鉴定

4.结果报告

?初级报告：镜检典型阳性结果，报告临床。

?最终报告：报告细菌种属、药敏试验、结果评价及建议；检出霍乱弧菌应立即向当地疾病预防控制中心报告

?阴性报告：根据分离目的菌而定;（三）临床意义

?能引起肠道感染的常见致病菌有沙门菌、志贺菌、霍乱弧菌及致病性大肠埃希菌等。

?能引起食物中毒的常见致病菌有沙门菌、副溶血弧菌、致病性大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肉毒梭菌、蜡样芽胞杆菌等

?幽门螺杆菌是引起胃炎、消化性溃疡主要致病菌，胃癌的危险因子;（一）标本的采集;（二）微生物学检验

1.常见病原菌;2.检验程序;白细胞数(LP);（1）涂片检查

?普通细菌检查：涂片行革兰染色镜检，根据染色性、形态及排列初步报告

?结核杆菌检查：制成厚涂片，抗酸染色镜检

?放线菌及诺卡菌检查;痰培养前的处理

①痰液的洗净

②痰液的均质化

?普通细菌培养

?嗜肺军团菌培养

标本→血琼脂、巧克力琼脂和BCYE琼脂平板→35℃，5％～10％CO2环境→根据培养时间、菌落特点等鉴定;异染颗粒;百日咳鲍特菌在CCBA培养基菌落