动物干细胞技术课件.pptxVIP

;動物幹細胞技術

指通過各種方法獲得幹細胞，經體外培養建立細胞系，並對其進行定向分化誘導研究，以期獲得需要的某一特定類型細胞。;幹細胞研究發展簡史

始於19世紀，至今已有1個世紀。

1896年，Wilson在一篇論述細胞生物學的文獻中，首次使用“幹細胞”這一概念，專門用於描述寄生蟲生殖系的祖細胞。

1981年，Evans和Kaufman用延遲胚胎著床的方法分離胚胎內細胞團，首次成功分離得到小鼠胚胎幹細胞，建成ES細胞系。2007年諾貝爾生理學和醫學獎。

至今已分離得到的胚胎幹細胞物種有：

金黃地鼠（1988）、貂（1993）、豬（1994，1997）、雞（1996）、恒河猴（1995）、絨猴（1996）。分離得到人的胚胎幹細胞（1998），分離得到人的胚胎生殖細胞（1998），目前不斷報導成年組織來源的的幹細胞。

;;;1、幹細胞的定義、分類、定位;1.2分類：

1.2.1根據細胞分化潛能的大小分為

全能幹細胞(totipotentstemcells)

三胚層多能幹細胞(pluripotentstemcells)

單胚層多能幹細胞(multipotentstemcells)

單能幹細胞(monopotentstemcells)

;

1.2.2根據細胞來源不同分為

①成體幹細胞ASC（Adult-derivedStemCell）

來源於胚胎（胚胎性幹細胞）

---胚胎幹細胞ES(embryonicstemcell)

---胚胎性生殖細胞EG（EmbryonicGermCell）

---畸胎瘤EC（embryoniccarcinormacells)。

③人工誘導多能幹細胞（ips細胞）

;（1）胚胎性幹細胞

ES細胞：指源於囊胚內細胞團(innercellmass，ICM)的胚胎幹細胞(embryonicstemcells,ESC)。

EC細胞：從畸胎瘤中分離得到的多能性細胞(embryoniccarcinormacells，EC)。

EG細胞：胚胎生殖細胞，從早期胎兒原始生殖細胞(primordialgermcells，PGCs)中分離到的細胞(embryonicgermcells,EGC）。

均屬三胚層幹細胞。

;形成過程：;（2）成體幹細胞

定義：

成體幹細胞是指一些具有組織特異性的細胞，它們主要用於維持細胞功能的穩定，具有修復和再生能力，能夠產生新的幹細胞，或者能按一定的程式分化，形成新的功能細胞，使組織和器官保持生長和衰退的動態平衡。

;成體幹細胞分類：

造血幹細??：存在於骨髓、外周血和臍帶血中，用於治療血液系統疾病以及多種實體腫瘤。

神經幹細胞：存在於中樞神經系統，進一步分化成中樞神經系統的某些細胞類型。

間充質幹細胞：存在於全身結締組織和器官間質中，由於它具有向骨、軟骨、脂肪、肌肉及肌腱等組織分化的潛能，因而利用它進行組織工程學研究。

表皮幹細胞：位於表皮基底層，具強大的增殖分化潛能，在體外可以分化成表皮全層細胞。表皮幹細胞作為組織工程皮膚的種子細胞，已經在治療燒傷方面發揮作用。

;;1.2.3根據幹細胞組織發生的名稱進行分類:;二、幹細胞的生物學特性及形態學特徵

;⑤具有多向分化潛能，能分化為各種不同類型的組織細胞，即具有分化發育的可塑性；

⑥分裂週期慢，絕大多數細胞處於G0期；

⑦幹細胞通過兩種方式生長：

對稱分裂，形成兩個相同的幹細胞，

非對稱式分裂，非對稱式分裂中一個保持親代的特性，仍作為幹細胞保存下來，另外一個祖細胞(短暫增殖細胞)不可逆的走向分化的終端成為功能專一的分化細胞。

;2.2幹細胞的形態學特徵;;早期胚胎桑椹胚或囊胚與抑制分化物共培養使之增殖並保持未分化狀態隨著傳代數的增多細胞數量越來越多直到建立ES細胞系。

?ES/EG細胞系建立的意義:為研究哺乳動物發育和遺傳以及細胞分化提供了大量的種源細胞。真正意義上的ES/EG細胞建系要求形成生殖系嵌合體後代。?;;

3.1ES細胞的來源:早期胚胎內生細胞團或原始生殖細胞（桑椹胚）

早期胚胎內細胞團；

從終止妊娠早期的胎兒組織中可分離出多能性幹細胞；

體細胞核移植胚胎。

（將去核的卵細胞与特定的单个体细胞用电融合法或化学融合法使两细胞相融合，细胞分裂发育并形成胚囊，然後分離內細胞群，獲得胚胎幹細胞）。

誘導多功能性幹細胞（inducedplu