新生儿溶血病筛查.ppt

ABO新生儿溶血病筛查

韩丽娟

新生儿溶血病

（hemolyticdiseaseofthenewborn,HDN）

是指母胎血型不合所致的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。胎儿从父方遗传所获ABO血型抗原为母方所缺乏，分娩过程中该胎儿血型抗原进入母体，使母体产生抗该血型抗原的抗体（IgG类）。当母体再次妊娠时，抗该血型抗原的抗体（IgG类）可通过胎盘进入胎儿血液循环，使胎儿在宫内或出生后发生大量红细胞破坏，出现一系列溶血性征象的疾病。在我国以ABO血型不合最常见，约占85.3%，但预后良好。RhD血型不合在我国发病率较低，约占14.6%，但往往出现中等程度或重度HDN。其它如MN、Kell血型系统等极少见，约占0.1%。

新生儿溶血病筛查目的

ABO新生儿溶血病筛查的目的是确定新生儿血型是否与母亲相合，证实患儿血清中是否有来自母体的抗体，以及患儿红细胞是否被来自母亲的免疫性抗体致敏。

检测方法

微柱凝胶法（抗人球蛋白试验）

检测原理

抗球蛋白试验主要用于检测血清中的不完全抗体和（或）补体。大部分IgG抗体与具有相应抗原的红细胞在盐水介质中能够特异性结合，但不发生肉眼可见的凝集反应，该类性质抗体为不完全抗体。不完全抗体主要是IgG类，IgG免疫球蛋白为7s的单体结构，分子量小。由于不完全抗体只能与一方红细胞抗原决定簇结合，不能同时与双方红细胞抗原决定簇结合。所以在盐水介质中，不完全抗体只能致敏红细胞而不能使红细胞出现可见的凝集反应。加入抗球蛋白试剂后，抗球蛋白分子的Fab片段与包被在红细胞上的球蛋白分子的Fc片段结合，从而通过抗球蛋白分子的搭桥作用而产生红细胞凝集，未被抗体致敏的红细胞不会发生凝集，因此采用此方法能够检测出血清中是否存在不完全抗体。

诊断标准

直抗、游离、释放试验确定ABO新生儿溶血病

（不包括O细胞阳性结果）见下表：

直抗实验

游离实验

释放实验

结论

—

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不能证实为血型免疫抗体引起的新生儿溶血病

+

—

—

可疑为新生儿溶血病

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+

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可疑为新生儿溶血病

—

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+

可以证实为ABO新生儿溶血病

+

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可以证实为ABO新生儿溶血病

—

+

+

可以证实为ABO新生儿溶血病

+

+

+

可以证实为ABO新生儿溶血病

诊断标准

临床医生应将三项试验结果结合以下情况加以诊断：

新生儿外周血常规

网织红细胞增高

血涂片可见有核红细胞

血液生化（可见胆红素水平偏高，＞34.8μmol／L）

新生儿溶血病临床症状

ABO血型系统母亲及婴儿血型配合情况

母亲血型

婴儿配合血型

婴儿不配合血型

O

O

A、B、AB

A

O、A

B、AB

B

O、B

A、AB

AB

O、A、B、AB

/

组合介绍

新生儿溶血病筛查——

新生儿ABO+RhD血型鉴定

直接抗人球蛋白试验

游离抗体检测

抗体放散试验

结果解释

直抗实验：是用于直接抗球蛋白试验的方法，检验新生儿红细胞上是否存在免疫抗体。一旦发现新生儿红细胞直抗阳性，既成为诊断新生儿溶血病的有利证据。ABO新生儿溶血病的直抗实验必须仔细操作才能得到明确结果。严重的也只能呈现弱阳性反应。

游离实验：是检测新生儿血清中的血型抗体，如果检出抗体并能够和新生儿红细胞反应，游离实验则为阳性。

结果解释

在三项实验中，直抗实验和释放实验都是检测红细胞上致敏的血型抗体，看似重复，其实这两个实验各有特点。通过直抗实验，我们可以区分ABO新生儿溶血病和其它血型系统引起的新生儿溶血病。ABO新生儿溶血病的直抗都很弱，一般不会超过“1+”。而其它血型系统引起的溶血病，特别是Rh新生儿溶血病，其直抗强度通常都超过“1+”，因此，我们可以通过直抗实验的强度预判新生儿溶血病的类型。

结果解释

另外，直抗阳性越强，通常意味着新生儿溶血病的病情越重，这一特点也是释放实验所不具备的。释放实验的特点是敏感度高，由于释放实验所使用的红细胞比直抗实验多几百倍，因此有可能达到较高的敏感度。释放实验是“三项实验”中敏感度最高的一项实验，也是判定新生儿溶血病最有利的证据。

影响因素

患儿血样采集时间：对于ABOHDN，血清学检测血样应该在出生后3-7天采集并完成实验，对于RhHDN，血清学检测血样应该在出生24小时内采集并完成实验，如果超过规定时间采集的血样，由于被致敏的红细胞大部分遭到破坏，三项试验可能出现阴性结果，又会使真正的新生儿溶血病漏检。

影响因素

放散试验的时间和温度：温度过高或时间过长，抗体可能变性；温度过低或时间缩短，抗体从红细胞上解离不完全。

被检标本：用EDTA抗凝血，避免出现假阳性；红细胞标本一定不能