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橄榄油中脂肪酸乙酯含量的测定气相色谱法

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SN/T5651-2024

6仪器和设备

6.1气相色谱仪：配备氢火焰离子化检测器(FID)和自动进样器。

6.2分析天平：感量0.0001g,0.00001g。

6.3固相萃取装置。

6.4涡旋振荡器。

6.5旋转蒸发仪。

7样品的制备和保存

振摇或颠倒混匀装有待测样品的密闭容器，使样品尽可能均匀。如样品出现凝固，可置于不超过30℃的水浴中加热至样品融化，充分混匀后尽快称样。制备好的样品室温下避光密封保存。

8试验方法

8.1分析步骤

8.1.1提取

准确称取0.05g(精确到0.0001g)样品，加人到10mL玻璃试管中，向试管中准确加人200gL内标工作溶液(5.4.2)。然后向试管中加人1mL.正己烷，涡旋混匀30s,待净化。

8.1.2净化

预先用6mL正己烷活化硅胶固相萃取柱，保持柱体湿润，将待净化液转移至活化后的硅胶柱中(分两次一共用2mL正己烷润洗试管，洗液一并加入硅胶柱中)。待样液全部流出后，用20mL.正己烷-乙醚溶液洗脱，自然滴下或流速控制在每秒1滴~2滴，收集洗脱液，待浓缩。

8.1.3浓缩

于旋转燕发仪上40℃减压浓缩至干，用1mL正己烷涡动溶解后，过0.45pm微孔滤膜，滤至玻璃进样小瓶中待测。

注：整个择作过程中，应减少按触塑轩制品。

8.2色谱参考条件

气相色谱参考条件如下：

a)程序升温：初始温度为50℃,以30℃/min升至100℃,保持1min,以20℃/min升至200℃,以5℃/min升至240℃,以35℃/min升至310℃保持3min;

b)载气及流速：载气为氮气，流速为1mL/min;

c)进样口温度：300℃;

d)进样模式：不分流进样，分流阀打开时间为1.5min;

e)尾吹气及流速：尾吹气为氮气，流速为30mL/min;D进样量：1pL.

8.3定性测定

在8.2测定条件下，样液中脂肪酸乙酯的保留时间应在标准溶液保留时间的士0.5%范围内，标准

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物质的气相色谱图见附录B。

8.4定量测定

将含有2.0gg/mL十七碳一烯酸乙酯内标的不同浓度4种脂肪酸乙酯混合标准工作溶液，注人气相色谱仪中进行分析，记录各脂肪酸乙酯和内标物的峰面积，以二者峰面积比为横坐标，以二者质量比为纵坐标，绘制标准曲线，标准曲线的斜率即为脂肪酸乙酯和十七碳一烯酸乙酯的校正因子f.4种脂肪酸乙酯和内标物质的保留时间见附录A.

8.5空白试验

不加试样，按照8.1~8.4步骤试验。

9结果计算和表述

试样中脂肪酸乙酯的含量采用内标法定量，橄榄油样品中脂肪酸乙酯含量按公式(1)计算：

…(1)

式中：

X——试样中脂肪酸乙酯的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);

A.——试样液中脂肪酸乙酯的峰面积；

m。——试样溶液中加入内标十七碳一烯酸乙酯的质量，单位为微克(pg);——脂肪酸乙酯和十七碳一烯酸乙酯的校正因子：

A.——试样中内标十七碳一烯酸乙酯的峰面积：

m——试样的质量，单位为克(g)1000——换算系数。

计算结果应扣除空白值，以重复性条件下获得的两次独立测定结果算术平均值表示，结果保留小数点后2位。试样溶液中待测物的响应值应在定量测定线性范围内，超过线性范围时，应根据测定浓度对样品进行适当倍数稀释后加入内标，按照8.1~8.4步骤试验再进行分析。

根据(EEC)No2568/91和COI/T.20/Docno.28.做榄油中脂肪酸乙酯含量以棕桐酸乙酯、亚油酸乙酯、油酸乙酯和硬脂酸乙酯总和计

10定量限

棕榈酸乙酯定量限为2.35mg/kg,亚油酸乙酯定量限为2.56mg/kg,油酸乙酯定量限为

3.33mg/kg,硬脂酸乙酯定量限为2.45mg/kg。

11回收率

在添加水平为4.00mg/kg~20.00mg/kg时，回收率范围为90.3%~108.5%,见附录C.

化合物

分子简式

CAS号

保闺时间min

相对保留时间(十七碳一烯酸乙酯)

棕稠酸乙酯

CE

628-97-7

13.236

0.93

十七碳一烯酸乙酯

CE

54546-22-4

14.252

1.00

亚油酸乙酯

CE

544-35-4

15.423

1.