《Hela细胞传代培养》课件.pptVIP

Hela细胞传代培养Hela细胞是一种永生化的细胞系，可用于各种生物医学研究。Hela细胞传代培养是维持细胞活力并扩大细胞数量的关键步骤。

Hela细胞简介来源Hela细胞系源自一位名叫海瑞塔·拉克斯的美国黑人女性的宫颈癌细胞。重要性作为第一个成功培养的永生化人细胞系，Hela细胞在生物医学研究领域具有里程碑式的意义。应用Hela细胞广泛应用于病毒学、肿瘤学、遗传学等领域，为医学和生物学发展做出了巨大贡献。

Hela细胞发现历史11951年HenriettaLacks21951年宫颈癌细胞31951年GeorgeGey41951年培养成功Hela细胞于1951年由美国医生乔治·盖伊（GeorgeGey）从一位名为海瑞埃塔·拉克斯（HenriettaLacks）的非洲裔美国妇女身上取出的宫颈癌细胞培养而成。海瑞埃塔·拉克斯是一位31岁的母亲，她在1951年被诊断出患有宫颈癌，并在同年因癌扩散而去世。盖伊博士在拉克斯去世后，从她的肿瘤中取出了少量细胞并进行培养。这些细胞与以往任何细胞不同，它们能在实验室中无限增殖。它们被命名为“Hela”细胞，以纪念海瑞埃塔·拉克斯。

Hela细胞特点和应用无限增殖Hela细胞具有无限增殖的能力，可用于长期培养和研究。对病毒易感Hela细胞对多种病毒易感，常用于病毒研究和疫苗生产。广泛应用Hela细胞在生物医学研究、药物筛选、毒理学研究等领域发挥着重要作用。

细胞培养基的配制1基础培养基基础培养基是细胞生长的基础，提供必要的营养物质，如氨基酸、维生素、无机盐和葡萄糖等。2血清血清是细胞培养基的重要组成部分，提供生长因子、激素、蛋白质等，促进细胞生长和增殖。3其他添加剂其他添加剂包括抗生素、抗真菌剂、指示剂等，用于控制污染和监测细胞生长状况。

细胞培养基配制步骤1准备材料培养基粉末、水、无菌瓶、移液器、过滤器等2溶解将培养基粉末溶解在水中，轻轻搅拌至完全溶解。3灭菌将溶解好的培养基用高压灭菌锅进行灭菌。4冷却将灭菌后的培养基冷却至室温。配制好的细胞培养基应储存在4℃冰箱中，使用前需再次进行无菌操作。

细胞培养基储备溶液配制配制步骤根据需要配制不同浓度的储备溶液，如双抗储备溶液、谷氨酰胺储备溶液、血清储备溶液等。溶解步骤将所需成分溶解于无菌水中，并进行过滤除菌。储存步骤储备溶液应分装并储存在-20℃冰箱中，避免反复冻融。使用步骤使用前将储备溶液从冰箱中取出，解冻至室温，并进行稀释后再加入到培养基中。

细胞培养基配制注意事项11.无菌操作严格执行无菌操作，防止细菌、真菌等污染。22.温度控制培养基在配制和储存过程中要严格控制温度，防止成分降解。33.pH值调节培养基的pH值对细胞生长至关重要，要及时进行调整。44.过滤除菌配制好的培养基需要用滤膜过滤除菌，确保无菌状态。

Hela细胞传代流程1准备阶段准备细胞培养基、胰酶、血清、培养皿、移液管、细胞计数板等。2消化阶段用胰酶消化细胞，使细胞从培养皿上脱落下来。3计数阶段用细胞计数板计数细胞数量，计算传代比例。4接种阶段将适量的细胞接种到新的培养皿中，加入培养基。5培养阶段将培养皿放入培养箱中进行培养，直至细胞长满培养皿。

Hela细胞传代注意事项无菌操作严格遵守无菌操作规程，避免污染。使用无菌器械、培养基和试剂。定期对培养箱进行消毒。细胞状态观察定期观察细胞状态，包括形态、生长速度、颜色等。及时更换培养基，防止细胞过度生长或死亡。消化时间控制胰蛋白酶消化时间过长会导致细胞损伤。根据细胞类型和培养状态调整消化时间，避免过度消化。细胞密度控制传代时要控制细胞密度，过高或过低都会影响细胞生长。根据细胞生长特性选择合适的传代比例，避免细胞生长过度拥挤或稀疏。

Hela细胞传代过程中出现的问题及解决Hela细胞传代培养过程中可能会出现多种问题，例如细胞生长缓慢、细胞形态异常、细胞污染等。针对这些问题，需要采取相应的措施进行解决，例如优化培养条件、及时更换培养基、严格消毒灭菌等。

Hela细胞常见污染及防治细菌污染细菌污染是细胞培养中常见的污染，主要表现为培养液浑浊，细胞形态异常，甚至死亡。真菌污染真菌污染通常表现为培养液中出现白色或灰色沉淀，培养基表面出现霉点，甚至出现菌丝。病毒污染病毒污染不易察觉，但会影响细胞的正常生长和功能。支原体污染支原体污染是细胞培养中常见的污染，但不易察觉，容易造成细胞形态改变，生长缓慢，甚至细胞死亡。

Hela细胞传代的评价指标11.细胞形态观察细胞的形态，包括大小、形状、核仁大小和数量等。正常Hela细胞形态圆形或卵圆形，核仁明显，细胞排列紧密。22.细胞生长速度记录细胞传代后的生长速度，包括细胞数量增加的速度和细胞分裂的时间。33.细胞活力通过台盼蓝染色法或MTT法等方法检测细胞活力。44.细胞功能检测细胞