植物组织培养第十二章3几种水果的组织培养.pptVIP

第十二章(3)水果作物的组织培养本章内容提要：草莓微茎尖培养葡萄的组织培养无花果的组织培养本章目的和要求：陈传红制作2007/5掌握草莓微茎尖培养的大致过程，了解鉴定草莓无毒病苗的方法；掌握葡萄的组织培养过程。掌握无花果的组织培养第一节草莓的组织培养陈传红制作2007/5形态特性和生物学特性草莓为重要的浆果植物，栽培分布很广，其总产量在浆果类中仅次于葡萄，居世界第二位。草莓果实柔软多汁，含丰富的糖、酸、矿物质，维生素等。草莓可鲜食，也可加工成果酱，果酒等。其颜色鲜艳，是良好的配餐食品。1.形态特性陈传红制作2007/5草莓属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，须根系，在土壤中分布较浅。01草莓的茎呈短缩状，分地上和地下部分，地上短缩茎节间极短，节密集，其上密集轮生叶片，叶腋部位着生腋芽。02匍匐茎是草莓的特殊地上茎，是其营养繁殖器官，茎细，节间长，一般座果后期发生。032.生物学特性陈传红制作2007/5草莓根系在土壤温度达到2℃时开始活动，在10℃时开始形成新根，根系生长的最适温度为15~20℃，秋季温度降低到7~8℃时生长减弱。1春季气温达5℃时植株开始萌芽，茎叶开始生长。草莓的根系分布较浅，加上植株矮小，叶片较大，因此蒸发量大。2在整个生长季节，叶片几乎都在不断地进行老叶死亡、新叶发生的过程，叶片更新频繁。3二、草莓脱毒苗的培养1.热处理脱毒将草莓植株在40~41℃温度下处理4~6周，然后取微茎尖培养。2.微茎尖脱毒初代培养：外植体消毒：匍匐茎上的顶芽，用自来水流水冲洗2～4h，剥去外层叶片，在无菌条件下，用0.5%次氯酸钠溶液表面消毒5min，并不停地搅动。于超静工作台上剥取茎尖并接种。培养基：MS+BA0.25+NAA0.25或MS+BA0.5+NAA0.2中。培养条件：22～25℃，光照16～18h，3000lx。经2～3个月的培养，可生长分化出芽丛。注意！在低温和短日照下，茎尖有可能进入休眠，所以较高的温度和充足的光照时间必须保证。(2)继代培养培养基：MS+BA0.5+NAA0.01可将芽丛小块分成单株，再转入前述的分化培养基中，又会重复上述过程，达到扩大繁殖的目的。(3)生根培养生根培养基：1/2MS+IBA0.1。(4)驯化、移栽：用镊子把草莓苗从试管瓶中取出，洗掉根系附带琼脂培养基。事先备好8×8cm或6×6cm的塑料营养钵，内装等量的腐殖土和河砂。栽前压实，浇透水，用竹签在钵中央打一小孔，将试管苗插入其中，压实苗基部周围基质，栽后轻浇薄水，以利幼苗基部和基质密合。要“深栽浅埋”，即根要深栽、根茎略高于地面。3．花药培养脱毒花药培养操作简单，因经愈伤组织途径，再分化得到的即为无病毒苗，所以可免去病毒鉴定工作。（1）取材与外植体消毒预处理：单核期的花蕾，置于洁净培养皿中，内放一层滤纸，滴蒸馏水数滴保湿，放入3～4℃冰箱中低温保存3～4d。外植体消毒：经预处理的花蕾先在70%酒精中浸泡半分钟，取出放入新配制的饱和漂白粉上清液中消毒10min，用无菌水冲洗3次。在超净工作台上剥取花药，立即接种。（2）植株分化陈传红制作2007/5培养基:MS+2,4–D0.4+IAA2.0。培养条件：24～26℃,光照10h/d，1500lx,20d后可产生乳白色的愈伤组织。（2）植株分化将诱导出的花药愈伤组织转移到1/2MS基本培养基，添加GA0.5，BA0.5和三十烷醇4。愈伤组织经培养后很快转绿，以后微带淡紫红色，15d后在表面分化出半球形小突起，转为绿色。20d后分化出幼叶、幼茎，并有不少突起物，以后陆续分化出新梢。四、草莓无病毒苗的鉴定陈传红制作2007/5草莓花药培养得到的为无病毒苗，而用生长点培养得到的植株，则必须经过病毒鉴定，确定其不带病毒，才可以大量繁殖，用于生产。01草莓病毒的种类草莓病毒主要有四种：斑驳病毒，皱叶病毒，脉结病毒和轻型黄边病毒。01草莓病毒的鉴定方法因草莓的病毒通过汁液接种不感染，所以通常采用小叶嫁接法来进行鉴定。01从被鉴定株采集新叶，除去两边的小叶，中央的小叶带1～1.5cm的叶柄，把它削成楔形作接穗。指示植物则除去中间的小叶，在叶柄的中央用刀切入1～1