ARNI通过Sirt1_PGC1α调控线粒体稳态减轻糖尿病肾病肾小管间质损伤的研究.pdfVIP

ARNI通过Sirt1/PGC1α调控线粒体稳态减轻糖尿病肾病肾小管间

质损伤的研究

摘要

目的：糖尿病肾病（DKD）是糖尿病患者常见且严重的微血管并发症之一。在DKD

RTECs

中，肾小管间质损伤与肾功能损害密切相关，研究表明肾小管上皮细胞（）

的线粒体损伤是促进肾小管间质损伤的重要因素，但具体机制尚未完全清楚。沉默

1Sirt1γ1α

信息调节因子（）能激活下游的氧化物酶体增殖物激活受体共激活因子

（PGC1α），从而调控线粒体功能损伤相关的基因，是DKD线粒体损伤的潜在治疗

-ARNI

靶点。沙库巴曲缬沙坦是一种血管紧张素受体脑啡肽酶抑制剂（），在多种肾

脏病动物模型中都有减轻蛋白尿、抑制肾功能减退的作用，对心力衰竭患者也有肾

ARNIDKD

脏保护作用，但其具体机制尚不完全明确，尤其是对肾小管间质损伤的

影响及机制尚未被进一步探讨。本研究拟探讨ARNI类药物沙库巴曲缬沙坦对DKD

肾小管间质损伤的改善作用，以及Sirt1/PGC1α调控的线粒体稳态在其中的参与机制，

为ARNI在DKD中的潜在应用价值提供理论依据。

8C57BL/6JCtrl

方法：周龄雄性小鼠随机分为对照组（）和实验组，实验组小鼠通

过连续5天腹腔注射50mg/(kg·d)的链脲佐菌素（STZ）以建立DKD动物模型。空

FBG16.7mmol/L

腹血糖（）高于的小鼠为模型构建成功。建模成功后的实验组小

鼠被随机分为DKD组、DKD+缬沙坦（Val）组、DKD+沙库巴曲缬沙坦（Sac/Val）

组，分别给予生理盐水、30mg/(kg·d)缬沙坦、60mg/(kg·d)沙库巴曲缬沙坦灌胃。灌

胃12周后，收集24小时尿液、血清、肾脏标本。测定血清肌酐（Scr）、血尿素氮

BUNN--β-D-NAG/

（），尿白蛋白、尿肌酐、尿乙酰葡糖胺酶（），并计算尿白蛋白

肌酐比值ACR。对肾脏组织标本进行光镜观察肾小管损伤和肾小管间质纤维化，电

镜观察肾小管细胞的线粒体形态。应用Westernblotting测定肾组织中肾损伤分子1

（KIM-1）、Collagen1、α-平滑肌动蛋白（α-SMA）、线粒体转录因子A（Tfam）、

cIVCoxⅣSirt1PGC-1α

细胞色素氧化酶（）、、的蛋白表达水平，免疫组化染色观

察肾组织中Tfam的蛋白表达。人肾小管上皮细胞HK-2细胞分为分正常糖组（NC）、

HMHG+HG+Val+LBQ657/

高渗组（）、高糖组（）、高糖缬沙坦处理组（）、高糖缬

沙坦处理组（HG+LBQ/Val；LBQ657，沙库巴曲在体内代谢后发挥效应的物质）、高

+LBQ657/+Sirt1EX527HG+LBQ/Val+EX52