高效液相色谱定量分析法长春崔珊珊课件.pptx

高效液相色谱

定量分析法

长春职业技术学院

崔珊珊

1STEP

01

色谱定量依据

STEP

02

色谱定量分析法

色谱定量依据

在一定的色谱条件下，组分i的质量(mi)或其在流动相中的浓度与检测器响应信号(峰面积Ai或峰高hi)成正比，即

定量的依据是一定条件下组分的峰面积与进样量成正比，但因检测器对不同物质的响应值不同，故，相同质量的不同物质通过检测器时，产生的峰面积不相等，因而，不能直接用峰面积计算组分含量，为此，引入了定量校正因子，以校正峰面积，使之能真实反应组分含量。

fi为定量校正因子

色谱定量依据

fi定量校正因子

绝对校正因子

指某组分i通过检测器的量与检测器对该组分的响应信号之比，亦即单位峰面积所代表的物质的量。

mi的单位用g、mol或体积表示时，相应的校正因子分别称为质量校正因子（fm），摩尔校正因子（fM）和体积校正因子（fv）。

色谱定量依据

fi定量校正因子

相对校正因子

相对质量校正因子的测定方法是：准确称取一定的待测组分的纯物质mi和标准物质的纯物质ms，取一定量在实验条件下注入色谱仪。出峰后分别测定峰面积Ai，As，由上式计算出质量校正因子。

定量分析方法

外标法：也称标准曲线法

测定方法：把待测组分的纯物质配成不同浓度的标准系列，在一定操作条件下分别向色谱柱中注入相同体积的标准样品。测得各峰的峰面积或峰高，绘制A-c或h-c的标准曲线。根据所得峰高或峰面积从曲线上查得含量。

色谱法一般采用外标法、内标法和归一化法进行定量分析。

定量分析方法

在已知组分标准曲线呈线性的情况下，可不必配置标准曲线，而用单点校正法测定。即配置一个与被测组分含量相近的标准物，在同一条件下先后对被测组分和标准物进行测定，被测物质的质量分数为：

外标法：也称标准曲线法

外标法的优点是操作简便，不需要校正因子，但要求准确进样量，适于日常控制分析和大量同类样品分析。其结果的准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性。

定量分析方法

内标法：

当只需测定试样中某几个组分，或试样中所有组分不能全部出峰时，可采用内标法。

其方法是，选择一种与样品性质相近的纯物质（样品中不存在）作为内标物，加入到一定质量的样品中，然后进行色谱分析，测量样品中被测物和内标物的峰面积或峰高。组分的质量分数可用下式计算：

定量分析方法

内标物的选择原则：

选择内标物时，它应是样品中不存在的纯物质；

内标峰位于被测组分峰附近并与组分峰完全分离；

内标物性质与样品中被测组分相近并能与样品互溶；

内标物浓度应恰当，其峰面积与待测组分相近。

内标法的优点：定量准确，对进样量和操作条件不要求严格控制，样品中

含有不出峰的组分时也能应用。

缺点：每次分析都要称取样品和内标物质量，比较费时，不适用于快速

控制分析。

定量分析方法

例:用气相色谱法测定样品中一氯乙烷、二氯乙烷和三氯乙烷的含量。采用甲苯做内标物，称取2.880g样品，加入2.400g甲苯，混合均匀后进样，测定其校正因子和峰面积如下，试计算各组分的含量。

组分

甲苯

一氯甲烷

二氯甲烷

三氯甲烷

fi

1.15

1.47

1.65

A/cm2

2.16

1.48

2.34

2.64

定量分析方法

归一化法：将样品中所有组分的含量之和按100%计算，

以它们相应的色谱峰面积或峰高为定量参数，通过公式计算组分：

归一化法简单准确，不必称量和准确进样，但不适合痕量组分分析；若样品中的组分不能全部出峰，不能应用。

当各组分的fi相同时：

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