紫外可见吸光光度法及分子.pptVIP

朗伯-比尔定律的适用条件*单色光应选用?max处或肩峰处测定.01稀溶液浓度增大，分子之间作用增强.02吸光质点形式不变离解、络合、缔合会破坏线性关系,应控制条件(酸度、浓度、介质等).03溶液浓度的测定A＝?bc工作曲线法(校准曲线)朗伯-比尔定律的分析应用01.02.03.04.0c(mg/mL)A。。。。*0.800.600.400.200.00AxcxA=A1+A2+…+An用参比溶液调T=100%（A=0），再测样品溶液的吸光度，即消除了吸收池对光的吸收、反射，溶剂、试剂对光的吸收等。吸光度的加和性与吸光度的测量2.2光度分析的方法和仪器*方便、灵敏，准确度差.常用于限界分析.2.2.1光度分析的几种方法1.目视比色法观察方向空白c1c2c3c42.光电比色法*通过滤光片得一窄范围的光(几十nm)光电比色计结构示意图滤光片*吸收滤光片：只允许指定的窄范围波长光通过，其他波长的光均被吸收.01选择滤光片的原则：滤光片透光率最大的光是溶液吸收最大的光,即滤光片的颜色与有色溶液的颜色互补.023.吸光光度法和分光光度计*光源单色器吸收池检测系统分光光度计的基本组成通过棱镜或光栅得到一束近似的单色光.波长可调,故选择性好,准确度高.分光光度计的主要部件*光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够 的光强度,稳定。 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm)氙灯：紫外、可见光区均可用作光源?/nm钨灯（热辐射光源）4006008001000氙灯（气体放电光源）氢灯强度氙灯氢灯钨灯二战期间，美国政府希望士兵得到较好的营养。但是当时，不知道食品中到底有什么维生素，有多少。在当时需要一个即便宜有快的方法。1941年，第一台commercialavailable的分光光度计问世。BeckmanDUSpectrophotometer.使得维生素的测定变得非常简单。假设这表示样品，I0为照射到样品上的一定波长的光强度（称为入射光强度），It为光通过样品之后的光强度。通过测量光强度的减弱来得出物质量，这种方法被称为分光光度法。那么，物质为何对光有选择性的吸收？光强度的减弱如何与物质的浓度联系起来？怎样测量光的减弱？*第2章紫外可见吸光光度法

2.1吸光光度法的基本原理2.2光度分析的方法和仪器2.3吸光光度法的灵敏度与准确度2.4显色反应与分析条件的选择2.5吸光光度法的应用2.6紫外可见分光光度法在有机定性分析中的应用化学分析与仪器分析方法比较*化学分析：常量组分(1%),Er:0.1%～0.2%依据化学反应,使用玻璃仪器仪器分析：微量组分(1%),Er:1%～5%依据物理或物理化学性质,需要特殊的仪器例:含Fe约0.05%的样品,称0.2g,则m(Fe)≈0.1mg重量法m(Fe2O3)≈0.14mg,称不准容量法V(K2Cr2O7)≈0.02mL,测不准光度法结果0.048%～0.052%,满足要求准确度高灵敏度高仪器分析方法分类*2.电化学分析法:依据物质的电化学性质及其变化3.色谱法:气相色谱,液相色谱4.质谱法、热分析法、放射化学法等非光谱法（折射法，浊度法，旋光法）（不以光的波长为特征讯号）光谱法分子光谱法UV/Vis,IR,MFS,MPS原子光谱法AAS,AES,AFS（以光的吸收、发射等作用而建立的分析方法，通过检测光谱的波长和强度来进行定性和定量的方法）光学分析法1.光学分析法:基于电磁辐射与物质的相互作用.分子光谱学 *紫外可见分光光度法(UV/Vis)UltraViolet/VisibleSpectrophotometry分子荧光光谱法(MFS)MolecularFluorescenceSpectroscopy者为四大波谱红外吸收光谱法(IR)InfraredSpectroscopy分子磷光光谱法(MPS)MolecularPhosphorescenceSpectroscopy光声光谱法(PAS)PhotoAcousticSpectroscopy拉曼光谱法(