血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义.pptx

血细胞分析仪原理及散点图临床应用

一、血细胞各通道分析原理及散点图分析

二、散点图案例分析

一、血细胞各通道分析原理及散点图分析

血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究参数，如直方图，DIFF散点图，NRBC散点图等。实验人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注的,进行涂片复检确认，提高工作效率，减少漏诊率。

DIFF

WBC/BASO

NRBC

半导体激光

荧光染色（聚次甲基+噁嗪）

主要原理

FSC前向散射光：细胞大小

SSC侧向散射光：复杂程度（细胞的颗粒和细胞核等内含物的信息）

SFL侧向荧光：核酸含量（DNA、RNA)

DIFF通道分析原理

4DL(阴离子表面活性剂）





完全溶解RBC PLT在WBC膜上打孔

溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在

SSC显示复杂程度是最大的。

4DS

对核酸染色

纵坐标：侧向荧光（SFL）

反映核酸含量

横坐标：侧向散射光（SSC）

反映细胞内部复杂程度

化学粘附

大分子有机酸与嗜酸粒细胞中的碱性颗粒发生化学粘附

嗜酸粒细胞

大分子有机酸

RNA/DNA荧光染色原理

成熟白细胞：高荧光特性

网织红细胞：弱荧光特性

血小板：

成熟RBC：

原始细胞：

幼稚细胞：

微弱荧光特性无荧光特性极高荧光特性极高荧光特性

荧光染色WBC分类的优势

检测异常细胞

提供幼稚粒细胞信息（IG）

提供原始细胞信息（Other）

10

S–FB溶血剂（酸性，低渗）

溶解RBC PLT

除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成裸核形态

Baso保持原状

纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小

横坐标：侧向散射光（SSC）

反映细胞内部复杂程度

嗜碱

其它有核细胞

嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液，

Baso内的蛋白为酸性蛋白，因此在该

溶液中受到保护，而其他有核细胞则被溶解成裸核

WBC/BASO通道分析原理

NRBC通道分析原理

NR溶血剂

完全溶解RBC，PLT

WBC保持原状

NRBC溶解为裸核

NR染液对核酸染色

纵坐标：前向散射光（FSC）



反映细胞大小

横坐标：侧向荧光（SFL）



反映核酸含量

NRBC%=NRBC#/NRBC_WBC#

出现有核红时

WBC的修正

红系增生活跃时，外周血易见较多的NRBC，在WBC计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。

WBC增多对RBC计数的干扰

RBC：阻抗法RBC值含WBC

WBC100*109/L时，需校正红系统参数

贫血越严重，对RBC影响越大

血红蛋白通道

光电比色法

SLS（十二烷基磺酸钠）：无氰无毒

二、散点图案例分析

嗜碱性粒细胞增多症

在BASO散点图上，嗜碱区域出现大量散点，另外

DIFF散点图上，中性区域

的左下方也为嗜碱区域，也出现了大量的散点。

 BASO%：仪器13.4%



镜检13.5%

AML-M1(例1)

不可信

DIFF散点图显示淋巴与单核之间融合，有分类结果，但不可信。

IMI散点图也提示大量原始细胞。

镜检发现有77.5%的原始细胞。

细胞表面标志CD13和CD33阳性，CD36阴性；为急性髓细胞性白血病。

AML-M2

DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分类。

IMI散点图显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。

NRBC散点图：红色散点

镜检发现有90%的原始细胞、3%的早幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞。

流式细胞仪检测结果显示细胞表面标志CD13和CD33阳性，为髓细胞性白血病。

AML-M3

DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分类。

IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。

NRBC散点图：红色散点

镜检发现3%的原始细胞，91%的早幼粒细胞、3.5%的中幼粒细胞，0.5%晚幼粒细胞。

AML-M4

DIFF散点图，白细胞区域出现大量

灰白色散点，完全融合，不分类。大致分成两群，一群为原始细胞，一群为幼稚粒细胞。

IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。

AML-M5b

DIFF散点图淋巴与单核融为一体，不分类，IMI

散点图显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。

镜检发现59%的原始细胞，

0.5%的早幼粒细胞，单核细胞24.5%。

慢粒危象

DIFF散点图OTHER区域出现大量散点，中性粒细胞上方也有少量散点，IMI散点图也出现大量

红色散点，仪器报警提示有大量原始细胞和幼稚粒细胞。

NRBC散点图：红色散点

镜检发现38.5%的原始细胞，幼稚粒细胞和幼稚的单核细胞。酯酶染色阴性或弱阳性，可被氟化钠抑制。这是一例慢粒急单变。

MDS

DIFF：淋巴细胞和单核细胞

之间界限不清，提示出现原始细胞。中性粒细胞散点向左下方延伸到嗜碱区域。

IMI：少