动物组织中氯霉素的残留测定－酶联免疫吸附法 DB34 T 821-2024.pdfVIP

ICS67.120

CCSX00

34

安徽省地方标准

DB34/T821—2024

代替DB34/T821-2008

动物组织中氯霉素的残留测定－酶联免疫

吸附法

DeterminationofchloramphenicolresiduesinanimalanimaltissuesEnzyme-linked

immunosorbentassay

2024-04-15发布2024-05-15实施

安徽省市场监督管理局发布

动物组织中氯霉素的残留测定－酶联免疫吸附法

1范围

本文件规定了畜禽肌肉、肝脏、肾脏、尿液及禽蛋、鱼肉、虾肉中氯霉素残留量的酶联免疫吸附测

定方法。

本文件适用于畜禽肌肉、肝脏、肾脏、尿液及禽蛋、鱼肉、虾肉中氯霉素残留量的快速筛选测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

残留在动物组织、禽蛋或尿液中的氯霉素经乙酸乙酯提取，正己烷脱脂后用于酶联免疫测定。试样

中的氯霉素与包被于微孔板中的抗原同特异性抗体进行竞争性免疫反应，加入一定量的显色底物和终止

液，在450nm处测定吸光度值，在一定浓度范围内，试样中氯霉素的含量与吸光度大小成反比。换算

后可以获得样本中氯霉素的残留量。

5试剂和溶液

5.1除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682的二级水。

5.2氯霉素酶联免疫试剂盒，2℃～8℃冰箱中保存。

5.2.1微孔板：包被有氯霉素抗体。

5.2.2氯霉素标准工作液：浓度分别为：0μg/L、0.02μg/L、0.06μg/L、0.18μg/L、0.54μg/L、

1.62μg/L。

5.2.3抗体工作液。

5.2.4酶标记物工作液。

5.2.5浓缩样品稀释液。

5.2.6浓缩洗涤液。

5.2.7底物A液。

5.2.8底物B液。

5.2.9终止液。

5.3乙酸乙酯。

5.4正己烷。

5.5样品稀释液：取浓缩样品稀释液（5.2.5），用水按1：9（V/V）稀释，混匀。

5.6洗涤工作液：取浓缩洗涤液（5.2.6），用水按1：19（V/V）稀释，混匀。

5.7底物A、B混合液：分别取底物A液（5.2.7）、底物B液（5.2.8），按1：1（V/V）充分混匀，在

5min内使用，避免搅拌，避免使用金属容器盛装。

6仪器设备

6.1酶标仪：450nm。

6.2分析天平：感量0.01g。

6.3匀浆机：≥10000rpm。

6.4离心机：≥5000g。

6.5振荡器。

6.6冰箱。

6.7氮吹仪。

6.8微量加样器及配套吸头：（单道20μL，50μL，100μL，多道50μL～300μL）。

7试样制备

7.1样品处理

7.1.1畜禽肌肉、肝脏、肾脏及鱼肉、虾肉

7.1.1.1畜禽肌肉、肝脏、肾脏，去筋膜；鱼去鳞去骨去内脏，取皮和肌肉部分；虾去头去壳去肠腺。

上述样品切成小块，制成糜状，10000rpm均质2min。

7.1.1.2取3g±0.05g均质样品，加入6mL乙酸乙酯（5.3），充分涡动2min，室温4000g