T_ZHCA 032-2024 驻留类化妆品温和性评价 重建表皮模型组织活力法.docxVIP

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团体标准

T/ZHCA032—2024

驻留类化妆品温和性评价重建表皮模型组织活力法

Evaluationformildnessofleave-oncosmeticproducts—Tissueviabilitymethodofreconstructedepidermalmodel

2024-01-15发布2024-04-15实施

浙江省健康产品化妆品行业协会

发布

Ⅰ

T/ZHCA032—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由浙江省食品药品检验研究院提出。

本文件由浙江省健康产品化妆品行业协会(ZHCA)归口。

本文件起草单位:浙江省食品药品检验研究院、广东博溪生物科技有限公司、珀莱雅化妆品股份有限公司、杭州捷诺飞生物科技有限公司、上海家化联合股份有限公司。

本文件主要起草人:何立成、匡荣、张艳云、金洋伊、欧阳杨、贾海东。

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T/ZHCA032—2024

驻留类化妆品温和性评价重建表皮模型组织活力法

1范围

本文件描述了采用重建表皮模型对驻留类化妆品温和性功效的评价方法。本文件适用于驻留类化妆品温和性功效的评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

驻留类化妆品leave-oncosmeticproduct除淋洗类化妆品外的化妆品。

3.2

温和性mildness

经过安全评估的受试物在正常、合理及可预见的使用条件下,未引起皮肤异常反应的特性。3.3

重建表皮模型reconstructedepidermalmodel

分离人包皮表皮细胞作为种子细胞,经过体外培养,制备成与人表皮组织具有相似结构及功能的三维组织模型。

4试验原理

将经安全性评价为无刺激性的受试样品均匀涂抹在重建表皮模型上,经过比刺激性测试更长的暴露时间或更高暴露量后,根据模型细胞的存活率,评价受试样品的温和性。

5试剂和材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。

5.1聚乙二醇单-4-辛基苯基醚(TritonX-100)。

5.2十二烷基硫酸钠(SDS)。

5.3异丙醇。

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5.4噻唑蓝(MTT)。

5.5磷酸盐缓冲液(DPBS):pH7.0~7.3,不含钙、镁离子。

5.61.0%TritonX-100溶液:吸取TritonX-100(5.1)10μL,溶于990μL水中,配制成体积分数为1.0%的TritonX-100溶液。

5.70.1%SDS溶液:称取SDS(5.2)10mg,溶于10mL水中,配制成质量分数为0.1%的SDS溶液。

5.8MTT溶液:称取噻唑蓝(5.4)20mg,溶于20.0mLDPBS(5.5)中,配制成质量浓度为1mg/mL的MTT溶液,临用现配。

5.9重建表皮模型试剂盒:EpiKutisRHE模型及其培养液或其他经验证的等效模型及其培养液。接收时模型与培养基接触界面不应有明显气泡或固体培养基变色情况(如黑紫色)。

5.10死亡组织模型:将重建表皮模型置于-20℃环境下冷冻24h以上。

6仪器设备

6.1天平:分度值为0.0001g。

6.2二氧化碳培养箱:37℃±1℃、CO2体积分数范围为(5±1)%、相对湿度≥95%。

6.3超净工作台或生物安全柜。

6.4外置活塞式移液器:最大量程为50μL、100μL、200μL。

6.5连续分液器:最大量程为25mL。

6.6计时器。

6.7微孔板振荡器。