橄榄油和橄榄果渣油中脂肪醇和三萜醇含量的测定 毛细管气相色谱法.docxVIP

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橄榄油和橄榄果渣油中脂肪醇和三萜醇含量的测定毛细管气相色谱法

1范围

本文件描述了橄榄油和橄榄果渣油中脂肪醇和三萜醇含量测定的方法，以质量含量（mg/kg）表示。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

ISO661动植物油脂试样的制备（Animalandvegetablefatsandoils—Preparationoftestsample）注：GB/T15687—2008动植物油脂试样的制备（ISO661:2003,IDT）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

脂肪醇含量aliphaticalcoholscontent

根据本文件规定的方法测定的脂肪醇C22、C24、C26和C28的质量分数之和。

4原理

以1-二十烷醇作为内标物，油脂经氢氧化钾-乙醇皂化后，以乙醚萃取不皂化物。脂肪醇和三萜醇通过碱性硅胶板从不皂化物中分离，收集的醇类衍生化为三甲基硅基醚(TMSE)，用毛细管气相色谱法分析。

5试剂

除非另有说明，仅使用分析级试剂，水为蒸馏水、脱盐水或同等纯度的水。

5.1氢氧化钾-乙醇溶液，c（KOH）约为2mol/L。

边冷却边配制，将130g氢氧化钾[w（氢氧化钾）=85%最低质量分数]溶解在200mL水中，用乙醇定容至1L。将溶液储存在密闭遮光的玻璃瓶中。

5.2氢氧化钾-乙醇溶液，c（KOH）约为0.2mol/L。

将13g氢氧化钾溶解在20mL水中，用乙醇定容至1L。

5.3乙醚。

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5.4无水硫酸钠。

5.5玻璃板：涂有硅胶，无荧光指示剂，厚0.25mm。合适的现成产品适合商用。

5.6丙酮：色谱纯。

5.7正己烷：色谱纯。

5.8乙醚：色谱纯。

5.9氯仿：色谱纯。

5.10薄层色谱用标准溶液：0.5g/100mLC20-C28脂肪族醇氯仿溶液或如9.2所示从橄榄果渣油中获得的部分醇。

5.112,7-二氯荧光素-乙醇溶液:质量浓度为0.2g/100mL。加入几滴氢氧化钾-乙醇溶液（5.1），使其略呈碱性。

5.12无水吡啶：色谱级。

5.13六甲基二硅氮烷（HMDS）。

5.14三甲基氯硅烷（TMCS）。

5.15三甲基硅基醚标准溶液（TMSE）：使用前由C20到C28的脂肪族醇纯品或混合物制备。

5.16内标溶液：1-二十烷醇氯仿溶液，质量浓度为0.1g/100mL。

5.17载气：氢气或氦气，色谱级。

5.18辅助气体：氮气，色谱级。

6仪器设备

6.1圆底烧瓶：容量为250mL，具有磨砂玻璃接头的回流冷凝器。

6.2分液漏斗：容量为500mL。

6.3圆底烧瓶：容量为250mL。

6.4薄层色谱展开槽：适用于20cm×20cm玻璃板。

6.5紫外灯：波长为366nm或254nm。

6.6微量注射器：容量分别为100μL和500μL。

6.7圆柱形过滤漏斗：具有G3多孔隔膜(孔隙度15μm至40μm)的，大约尺寸:直径2cm，深度5cm，12/21毛玻璃接头（公头），适合真空下过滤。

6.8真空锥形瓶：容量50毫升，12/21毛玻璃接头（母头），可安装到过滤漏斗(6.7)。

6.9试管：容量10mL，底部为锥形，具有密封塞。

6.10气相色谱仪：适用于毛细管柱，配备6.11~6.14配件。

6.11柱温箱：能将温度保持在±1℃以内。

6.12分流注射装置：温度可调，带有去硅烷化处理的玻璃蒸发元件，或柱上装置。

6.13火焰离子化检测器。

6.14积分系统。

6.15熔融二氧化硅毛细管柱：长20m至30m，内径0.25mm至0.32mm，具有SE-52或SE-5411)液相或等效物，膜厚在0.10μm和0.30μm之间。

6.16气相色谱用微量注射器：容量10μL，配硬针头。

6.17分析天平：感量1mg(显示0.1mg)。

6.18干燥器：含氯化钙干燥剂。

6.19烘箱。

7扦样

扦样不是本文件所规定的内容。推荐采用ISO5555。

实验室收到的样品应具有真实的代表性,且在运输和储藏过程中未受损坏或变质。8试样制备

按GB/T15687的规定制备试样。

9操作步骤

9.1不皂化物制备

9.1.1使用500μL