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第2节动物细胞培养【本节聚焦】1.动物细胞培养需要哪些基本条件?2.动物细胞培养的基本操作过程是什么?3.怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险?第二章细胞工程
科技探索之路:动物细胞工程的发展历程首例胚胎移植成功首创动物组织体外培养法发现哺乳动物精子获能现象体细胞核移植成功试管家兔诞生创立单克隆抗体技术胚胎分割移植成功分离和培养小鼠胚胎干细胞克隆羊多莉诞生获得诱导多能干细胞单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。1890年1907年1951年1958年1959年1975年1978年1981年1996年2006年2014年2017年
问题探讨3月13日清晨,江苏南京一小区居民家中突发火灾,由于现场火势较大,屋内两人无法逃脱,丈夫把妻子放在阳台护栏外侧,紧紧拉着妻子不放手,自己却烧伤,随后,消防员赶到,将屋内两人救出。大面积烧伤的病人需要移植健康皮肤思考:怎样获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?1)使用他人皮肤?患者自身的不够用,如何解决?2)自身健康皮肤?通过细胞培养构建的人造皮肤非常有限免疫排斥反应
问题探讨动物细胞工程动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合动物细胞工程的基础人造皮肤克隆猴:中中和华华单克隆抗体
问题探讨4.培养对象:胚胎或幼龄动物的细胞幼龄个体的细胞分化程度低、分裂能力强,易培养。1.概念:2.原理:3.地位:动物细胞工程的基础从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。细胞分裂(增殖)【思考】:动物组织的选择:幼龄动物or老龄动物幼龄个体的细胞分化程度低、分裂能力强,易培养。5.目的:获得细胞或者细胞产物动物细胞培养:在适宜的培养条件下如何分散
一、动物细胞培养的条件﹤动物细胞培养所需基本条件﹤营养条件其他条件糖类氨基酸无机盐维生素等适宜温度、pH和渗透压无菌、无毒的环境适宜的气体环境思考①直接用合成然培养基吗?Why?②如何维持无菌、无毒的环境?③适宜的温度、pH和渗透压分别是多少?④气体环境?分别有什么作用?装置?
一、动物细胞培养的条件1.快速繁殖1.营养培养皿培养瓶水、糖类(葡萄糖)、氨基酸、无机盐、维生素……已知成分:将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。称为合成培养基。未知成分:使用合成培养基时,通常需加入血清等一些天然成分。血清中含有人类尚未全部研究清楚、细胞生长和增殖所必需的物质。注意:培养动物细胞一般使用液体培养基,也称为培养液。
一、动物细胞培养的条件1.快速繁殖2.无菌、无毒的环境无菌①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理②在无菌环境下进行操作定期更换培养液无毒如何防止培养过程中的微生物污染?在细胞培养液中添加一定量的抗生素定期更换培养液的目的是什么?以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
一、动物细胞培养的条件3.温度、PH、渗透压:多数动物细胞生存的适宜pH为________①适宜的温度:36.5±0.5℃7.2-7.4维持细胞正常的形态和功能哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜;维持适宜渗透压的目的______________________②适宜的pH:③适宜的渗透压:
一、动物细胞培养的条件4.气体环境:动物细胞培养所需气体主要有_____和______用培养皿或松盖培养瓶,在含有_______________和__________的混合气体的__________O2CO2细胞代谢所必需的维持培养液的pH95%空气5%CO2CO2培养箱①组成不同气体的作用是什么?②培养仪器(95%)O2:(5%)CO2:
二、动物细胞培养的过程合作探究一:请同学们自主阅读教材P44-45,小组合作思考讨论完成问题。1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢?可用什么方法?2.体外培养动物细胞有哪些类型?3.什么是细胞贴壁?什么是接触抑制?4.什么是原代培养和传代培养?5.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?6.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同之处与不同之处?
二、动物细胞培养的过程传代培养放入CO2培养箱中培养取动物组织制成细胞悬液转入培养液进行原代培养放入CO2培养箱中培养分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养
二、动物细胞培养的过程分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代培养制成细胞悬液取动物组织一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。细胞分化程度低,增殖能力强,容易培养。(1)取材对象:(2)取材原因:1.取动物组织
二、动物细胞培养的过程分瓶取动物组织分散成单个细胞制成细胞悬液原代培养传代
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