遗传变异的概念及物质基础.ppt

一、突变与育种（一）、自发突变与育种：1、生产选育：富于实际经验并且善于细致观察的人们在日常生产过程中，发现自然突变，选育优良菌株。2、定向培育：用某一特定因素长期处理某一微生物培养物，同时不断对它们进行传代，以达到累积并选择相应的自发突变体的一种古老的育种方法。过程十分缓慢，“守株待兔”。

第94页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种分离筛选步骤1、采样（土壤、食品等）2、增殖培养（数量不足时）3、纯种分离（稀释、划线、组织分离等）4、纯培养（扩大）5、生产性能测定第95页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种（二）、诱变育种：利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的细胞群，大幅度提高突变频率，通过简便、快速和高效的筛选，从中挑选符合育种目的的突变株。发酵工业和其他微生物生产部门使用的高产菌株，几乎都是通过诱变育种而大大提高了生产性能的。提高产量、改进质量、扩大品种和简化生产工艺等，是使用最广泛的育种手段之一。第96页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种1、诱变育种的基本结果：以高产突变株为例--------诱变

出发菌株－－{绝大多数死亡-------

---------------少数存活{-多数未变-多数负变

----------------------------少数突变{-少数正变少数正变{-多数幅度小---------------------------------------少数幅度大{多数不宜投产少数适宜投产第97页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种2、诱变育种的基本路线：确定出发菌株→纯化选优→性能测定→同步培养→制备单细胞（单孢子）悬液→活菌浓度测定→诱变剂选择与剂量确定预试验→诱变处理→平板分离→计数（变异菌落与突变率）→挑取疑似菌落纯培养→突变体初筛→复筛→摇瓶发酵试验→选出突变体→生产试验或重复诱变处理（详情见教材）第98页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种3、诱变育种的原则：挑选优良的出发菌株-处理单孢子(或单细胞)悬液选择简便有效、最适剂量的诱变剂--

第99页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种出发菌株是用于育种的原始菌株。①选用单倍体纯种，排除异核体和异质体影响；②采用优良性状菌株；③选择对诱变剂敏感的菌株，或改变菌株的遗传型，提高菌株敏感性；④高产突变往往需要逐步累积，有必要多选一些经过诱变的菌株为出发菌株，进行多步育种，确保高产菌株的获得。

第100页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种诱变育种必须使用均匀状态的单细胞悬液。诱变剂一般只作用于DNA双链中的某一条单链，因此，处理多核或单核细胞、孢子时，某一突变无法反映在当代的表型上。只有经过DNA复制和细胞分裂，表型才会发生变异，出现不纯菌落，称为“表型延迟”。这是初次分离的菌株经传代后很快出现生产性状“衰退”的主要原因。诱变霉菌或放线菌稍加萌发的孢子；芽孢杆菌的芽孢(只有一个核质体)；细菌对数期诱变处理效果较好。

第101页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种诱变剂主要有物理诱变剂和化学诱变剂。如紫外线、X射线、γ射线和快中子等；烷化剂、碱基类似物和吖啶类化合物。最常用的烷化剂有N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(NTG)、甲基磺酸乙酯(EMS)、甲基亚硝基脲(NMU)、硫酸二乙酯(DES)、氮芥、乙烯亚胺和环氧乙烷等。物理诱变剂剂量：强度×时间，紫外线强度单位是尔格，X射线单位是伦琴或拉得等；化学诱变剂剂量：一定温度下诱变剂浓度和处理时间。常采用杀菌率作各种诱变剂的相对剂量。第102页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种诱变剂的作用：①提高突变频率；②扩大产量变异幅度；③使产量变异向正变(提高)或负变(降低)的方向移动。凡在高诱变率的基础上既能扩大变异幅度，又能促使变异移向正变范围的剂量，就是合适的剂量。第103页，共151页，星期日，2025年，2月5日诱变剂的剂量对产量变异的影响：a.未经诱变剂的处理--b.变异幅度扩大c.正变占优势--d.负变占优势第104页，共151页，星期日，2025年，2月5日一、突变与育种确定合适剂量，要多次试验。正变较多出现在偏低剂量中，负变则相反；经多次诱变而提高产量的菌株，更容易出现负变。过去用紫外线作诱变剂，常采用杀菌率为99或99.9%的剂量，近年来倾向于采用杀菌率为70%～75%，甚至更低(30%～70%)的剂量，特别是对于经多次诱变后的高产