DNA的粗提取与鉴定.pdf

2022年高考生物总复习：DNA的粗提取与鉴定

(1)实验原理

(2)操作流程

(1)为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？

提示蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，

使血细胞破裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核

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膜的破裂)，从而释放出DNA。

(2)若用植物细胞提取DNA需加入洗涤剂和食盐，其作用是什么？

提示洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的

主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。

(3)为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？

提示用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐

浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析

出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。

1.(2015·广东卷，3)关于DNA的实验，叙述正确的是()

A.用兔的成熟红细胞可提取DNA

B.PCR的每个循环一般依次经过变性—延伸—复性三步

C.DNA溶液与二苯胺试剂混合，沸水浴后生成蓝色产物

D.用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色，细胞核呈绿色，细胞质呈红色

解析DNA的粗提取和提纯，所用原料一般是鸡血或者菜花，不能使用哺乳动

物成熟的红细胞，因为其中不含细胞核和细胞器，极难提取到DNA，A不正确；

PCR又称多聚酶链式反应，每个循环包括高温变性－低温复性－中温延伸三个

步骤，而且顺序不能颠倒，B错误；在沸水浴的条件下，DNA与二苯胺反应呈

现蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂，C正确；甲基绿染液只能染

DNA成绿色，细胞核中含有大量DNA分子，故用甲基绿对人的口腔上皮细胞染

色，细胞核呈绿色，用甲基绿无法对细胞质进行染色，D错误。

答案C

2.PCR技术是分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA的半保

留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图所示)，在很短的时间内，将DNA

扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)PCR的全称是________，94℃高温使DNA双链打开，这一步是打开________

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键，称为________。而这一过程在细胞内是通过________酶实现的。

(2)当温度降低时，引物与模板________端结合，在________的作用下，引物沿

模板延伸，此过程中原料是________，遵循的原则是________。

(3)PCR技术的必要条件除模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即

液体环境、适宜的________和________，前者由PCR仪自动调控，后者则靠

________来维持。

(4)DNA的复制需要引物，其主要原因是________________________。引物的实

质是________，若将1个DNA分子拷贝10次，则需要在缓冲溶液中至少加入

________个引物。

解析打开DNA双链需破坏碱基对间的氢键；引物的游离端为5′端，即合成DNA

时从新链的5′→3′端延伸，故引物需与模板的3′端结合；PCR所用液体环境需保

障适宜的温度和pH，其pH可借助缓冲液维持；DNA复制不能从头开始，故必

须提供引物。在DNA分子扩增时，需要2种引物，由于新合成的链都需要引物

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作为复制的起点，故所需的引物数目等于新合成的DNA链的数目，即2×2－2

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＝2－2。

答案(1)多聚酶链式反应氢变性解旋

(2)3′热稳定DNA聚合酶四种脱氧核苷酸碱基互补配对

(3)温度pH缓冲液

(4)DNA的复制不能从头开始，DNA聚合酶只能从引物的3′端延伸DNA链单

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链RNA或者单链DNA分子2－2

1.生物体内DNA复制与PCR反应的区别

体内DNA复制PCR反应

在解旋酶作用下，细胞提供能加热至90℃，双链全部解开，不需

解旋

量，部分解开