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微生物的培育与应用
(30分钟100分)
1.(9分)(2024·广西三市联考)在燥热的夏天,簇新的肉若不刚好处理,不久其表面便因微生物生长出现黏液状物质。通过菌落特征可确认此微生物为细菌。请回答以下问题:
(1)培育细菌常用到选择培育基。培育基中不加入_________可以选择培育自养型微生物。?
(2)微生物接种最常用的是平板划线法和_____法。后一种方法还可用于活菌计数,其原理是__________________。除了上述的活菌计数法外,_____________也是测定微生物数量的常用方法。?
(3)分解尿素的细菌的分别,需在培育基中加入_________指示剂。而分解纤维素的微生物的分别,需在培育基中加入_________(染料)来筛选。?
【解析】(1)自养型微生物可以利用无机碳源合成有机物,因此培育基中不加入有机碳源可以选择培育自养型微生物。(2)微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,其中稀释涂布平板法还可以用于菌种的计数,其原理是:当样品的稀释度足够高时,培育基表面的一个菌落来源于稀释液中的一个活菌,通过统计菌落数,就能推想样品中的活菌数;此外微生物还可以用显微镜干脆计数。(3)微生物的鉴定常用鉴别培育基,在以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂,视察是否变红,可用来鉴定分解尿素的细菌;在以纤维素为唯一碳源的培育基中加入刚果红,视察是否有透亮圈产生,可用来鉴定纤维素分解菌。
答案:(1)有机碳源
(2)稀释涂布平板当样品的稀释度足够高时,培育基表面的一个菌落来源于稀释液中的一个活菌,通过统计菌落数,就能推想样品中的活菌数显微镜干脆计数
(3)酚红刚果红
2.(10分)生物爱好小组尝试运用所学的学问对某河段的大肠杆菌的数量进行检测。请回答下列相关问题:
(1)配制培育基时加入的乳糖属于培育基成分中的_______。对培育基进行灭菌时,一般运用___________(填仪器名称)。灭菌后,待冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰旁边________。大肠杆菌在伊红美蓝培育基上生长呈黑色菌落,从功能上划分,该培育基属于_______培育基。?
(2)在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培育了一段时间,这样做的目的是_______________________________。?
(3)检测大肠杆菌含量时,将1mL河水样品稀释10倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液;经适当培育后,3个平板上的黑色菌落数分别为62、65和68。据此可得出每升样品中的活菌数为_______个。?
(4)该小组通过统计菌落的数目,计算出单位体积样品中大肠杆菌数目,理论上他们的统计值比实际值_______(填“偏高”或“偏低”),理由是___________________________________。?
【解析】(1)乳糖是二糖,由C、H、O三种元素组成,可以为微生物的培育供应碳源。培育微生物的培育基一般运用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。灭菌后,待冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰旁边倒平板。大肠杆菌在伊红美蓝培育基上生长呈黑色菌落,从功能上划分,该培育基属于鉴别培育基。(2)在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培育了一段时间,作为空白比照,以检测培育基平板灭菌是否合格。(3)3个平板上的黑色菌落数分别为62、65和68,则3个平板上黑色菌落的平均数为65,因此每升样品中的活菌数=65÷0.1÷1000
×10=6.5×106(个)。(4)由于在培育过程中两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能视察到1个菌落,因此理论上他们的统计值比实际值偏低。
答案:(1)碳源高压蒸汽灭菌锅倒平板鉴别
(2)检测培育基平板灭菌是否合格(3)6.5×106
(4)偏低两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能视察到1个菌落
3.(10分)莠去津是一种含氮农药,在土壤中不易降解,为修复被其污染的土壤,可按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答:(已知莠去津在水中溶解度低,含过量莠去津的固体培育基不透亮)
(1)由图推断,从A瓶到C瓶液体培育的过程称为_______,目的是____。?
(2)在将C瓶菌种接种到固体培育基之前通常要进行_______,将菌种接种到固体培育基的方法有平板划线法和_______法,从图中看本试验采纳的是_______(填“前者”或“后者”)。?
(3)一段时间后,培育基出现无透亮圈和有透亮圈两种菌落,我们筛选的目的菌是菌落中________的细菌,该菌落生长所需的氮元素主要来自_______。?
(4)为弄清固体培育基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培育基,应如何设置比照组?_________________________________
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