菌种的管理和保藏.ppt

关于菌种的管理和保藏第1页，共35页，星期日，2025年，2月5日菌种保藏的重要性菌种保藏是微生物检验工作中的一项常规技术科学保藏和管理关系到检验结果的正确性.第2页，共35页，星期日，2025年，2月5日菌种的—2015版指导原则原则：应来自认可的国内或国外菌种保藏机构的标准菌株，或使用与标准菌株所有相关特性等效的商业派生菌株。第3页，共35页，星期日，2025年，2月5日使用菌种来源

菌种编号2015版CMCC——中国医学菌种保藏中心CMCC（F）真菌CMCC（B）细菌协调案ATCC美国标准菌种收藏中心NCIMB英国食品工业与海洋菌种保藏中心NBRC日本技术评价研究所生物资源中心CIP法国巴斯德研究所菌种保藏中心第4页，共35页，星期日，2025年，2月5日菌种保藏的中心任务-广泛收集。-选择最适宜的保藏方法，保持菌种的生物学特性。第5页，共35页，星期日，2025年，2月5日常用菌种的保藏菌种保藏的原则根据微生物菌种的生理、生化特性，尽量降低微生物细胞的代谢强度，处于休眠状态，以减低菌种的变异率。第6页，共35页，星期日，2025年，2月5日常用菌种的保藏—2015指导原则试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0代）。采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。冷冻保藏：在低温下保藏，一般在低于-30℃或-70℃，是有效的长期储藏方法。冻干法保藏：是一种长期保藏菌种的方法法。冷藏：在2～8℃保藏，是短期储藏方法。第7页，共35页，星期日，2025年，2月5日菌种的保藏低温、干燥、缺氧、缺乏营养等环境条件都可以抑制微生物的代谢和生长繁殖，因此低温、干燥和真空是菌种保藏的重要手段。第8页，共35页，星期日，2025年，2月5日菌种的保藏工作菌株不可代替标准菌株，标准菌株的商业衍生物仅可用作工作菌株。标准储备菌株可用于制备每月或每周一次转种的工作菌株。冷冻菌株一旦解冻转种制备工作菌株后,不得重新冷冻或再次使用。第9页，共35页，星期日，2025年，2月5日菌种的保藏不同的微生物，应根据其生物特征来选择最适宜的保藏方法：⑴?挑选特征典型的纯菌菌落⑵确定保藏的合适菌体形态⑶选择最适宜的方法保藏⑷定期检查第10页，共35页，星期日，2025年，2月5日菌种的保藏方法主要原理适用的微生物保藏时间特点液氮超低温保藏法超低温广泛数十年复杂、需要专门设备，有效冷冻真空干燥保藏法干燥、缺氧、低温广泛5～10年以上复杂、需要专门设备和方法，有效干燥（沙土、牛奶）保藏法干燥、无营养产孢微生物1～10年较简便，需制备沙土管，有效液体石蜡保藏法低温、缺氧广泛1年以上简便琼脂斜面低温保藏法低温4℃广泛短时间简便液体冷冻保藏法液体培养基低温广泛半年以上简便一定比例甘油低温、缺氧广泛数十年以上简便瓷珠冷冻保藏法低温广泛1年以上简便第11页，共35页，星期日，2025年，2月5日琼脂斜面低温保藏法菌种培养基保存温度传接时间金黄色葡萄球菌?营养琼脂斜面培养基???4℃??约1个月?大肠埃希菌乙型副伤寒沙门菌枯草芽孢杆菌铜绿假单孢杆菌?室温生孢梭菌疱肉培养基?4℃?约3个月白色念珠菌改良马丁琼脂斜面培养基黑曲霉第12页，共35页，星期日，2025年，2月5日

液体冷冻保藏法制备方法1%蛋白胨、甘油?,灭菌,接种、培养18-24小时.保存条件-80℃可保存数年.第13页，共35页，星期日，2025年，2月5