肿瘤分子生物标志物的流式定量分析.ppt

㈡癌基因C-erbB-2蛋白产物癌基因C-erbB-2位于17号染色体Q21区带上，编码分子为185－190k。有作者研究认为，C-erbB-2癌基因活化，其蛋白产物过量表达在癌症的发生机制中起重要作用。近来有人发现C-erbB-2基因蛋白过量表达和乳腺癌的转化机制有特殊关系，他们用NIH/3T3细胞做转染实验，发现C-erbB-2基因具有促发肿瘤的作用，C-erbB-2蛋白的过量表达，使细胞增殖失去调控，促进细胞恶性转化。第30页，共49页，星期日，2025年，2月5日目前研究最多是c-erbB-2癌基因蛋白与乳腺癌的关系，很多文献报道了C-erbB-2在乳癌细胞中的过量表达与乳癌的组织分级，淋巴结转移及激素受体、细胞增殖周期和DNA倍体以及和临床预后关系。有人应用流式细胞术的免疫荧光技术定量研究了乳腺癌、乳腺囊性增生和囊性增生癌变细胞的C-erbB-2蛋白表达，发现囊性增生和囊增癌变细胞的C-erbB-2蛋白表达量逐渐增高，提示在囊性增生并癌变的过程中，C-erbB-2蛋白的过量表达是早期癌变的一个标志物，可作为乳癌早期诊断的一个参考指标。第31页，共49页，星期日，2025年，2月5日他们的研究还发现，C-erbB-2蛋白过量表达的乳癌，DNA含量常为异倍体，且增殖指数也增高。说明C-erbB-2蛋白过量表达对加速细胞DNA合成和细胞增殖有重要作用，大部分研究报道认为，乳腺癌细胞中C-erbB-2蛋白的表达与如下参量有关：第32页，共49页，星期日，2025年，2月5日①与组织学分级有关，随分级的增高，C-erbB-2呈现高表达。②与淋巴结转移和无转移有关。③与DNA倍体有关，二倍体肿瘤表达量低，异倍体肿瘤表达高。④与雌激素受体有关，C-erbB-2蛋白过量表达的乳癌，受体常为阴性。而表达量低的乳癌，受体常为阳性。⑤与临床预后有关，C-erbB-2表达过量的乳癌，无病生存期和总存活期明显缩短，常出现肿瘤复发，而C-erbB-2蛋白表达量低，预后较好，认为是一个重要的预后参数。第33页，共49页，星期日，2025年，2月5日四、肿瘤转移基因CD44CD44基因位于人类11号染色体的短臂上，可分为两种类型，按其外显子表达方式，可称为组成型CD44S和变异型CD44V。研究表明，正常情况下，CD44S基因蛋白是广泛存在细胞膜的跨膜糖蛋白，在大多数上皮细胞、间质细胞和淋巴细胞等均可以检测到该糖蛋白的表达，研究发现，CD44基因蛋白的作用，主要参与细胞与细胞、细胞与基质之间的特异性连接，有如下功用:第34页，共49页，星期日，2025年，2月5日①介导淋巴细胞与毛细血管的小静脉内皮细胞的结合。②参与淋巴细胞的活化。③能与细胞外基质中的透明质酸胶原蛋白、纤维粘连蛋白、层连蛋白分子结合。④参与细胞骨架蛋白结合，使细胞伪足形成，参与细胞迁移运动。变异型CD44V基因与肿瘤转移的关系，是近期人们最新的实验中发现的，目前已成为研究肿瘤转移的一个新的热点课题。第35页，共49页，星期日，2025年，2月5日第1页，共49页，星期日，2025年，2月5日近年来已经发现多种肿瘤生物分子标志物，已将标志物应用于肿瘤诊断、判定疗效、预测预后和转移等方面，且有较大的肿瘤临床和研究的实用价值，并在研究癌变的发生和发展机制中引起人们的极大关注，特别在癌前期病变肿瘤标志物研究中，成为肿瘤防治研究的热点之一，已经显示出在癌变研究中具有重要意义。流式细胞应用于肿瘤分子生物标志的检测已有较多的文献报道，如DNA异倍体、激素受体、癌基因和抗癌基因蛋白产物等，发现这些标志物与恶性肿瘤的发生、发展和细胞的分化、分级、转移和预后有一定相关性，现分述如下：第2页，共49页，星期日，2025年，2月5日一、DNA异倍体研究证明，大部分恶性肿瘤有DNA含量的异常改变(DNA含量的增多或减少)，Badogie等报道，实体瘤的异倍体检出率在60-100%。由于肿瘤细胞在增殖分裂过程中出现DNA合成的丢失或不分离，而产生了DNA异常的细胞群，即出现DNA异常的干系(克隆)，这种DNA异常干系，即称为DNA异倍体。流式细胞术定量分析DNA异倍体，应用于肿瘤的早期诊断和预后评价方面。第3页，共49页，星期日，2025年，2月5日㈠癌前病变出现DNA异倍体及在癌变早期诊断的意义。癌前期病变是肿瘤防治研究中的一个重要课题，从癌前病变中发现早期癌变的患者，并找出作为早期癌变的特征性标志物，是人们一直努力探寻的方法，使肿瘤得到早期发现、早期治疗具有重要意义。研究发现，在众多的癌前病例中，并非所有的癌前病变都将发生、发展成为癌症。哪些癌前病变将发生癌变，哪此将不发生癌变，是人们正在努力寻找作为癌变的恃