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分子生物学实验技术知识点汇总

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1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。

2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。

一、选择题

1.下列哪种分子生物学技术主要用于DNA序列测定？

a.Southernblotting

b.Northernblotting

c.Westernblotting

d.DNAsequencing

2.PCR反应中，引物的作用是什么？

a.增强DNA变性

b.促进DNA复性

c.作为DNA合成的起点

d.增强DNA聚合

3.限制性内切酶的特点是什么？

a.能够识别并切割特定的DNA序列

b.具有特异性

c.只能切割双链DNA

d.以上都是

4.转基因技术中，常用的载体是什么？

a.噬菌体

b.真核细胞染色体

c.质粒

d.线粒体DNA

5.RNA干扰技术中，siRNA的作用是什么？

a.作为模板引导RNA的合成

b.降解目标mRNA

c.促进DNA合成

d.以上都不是

6.Westernblotting技术中，抗体用于检测哪种分子？

a.DNA

b.蛋白质

c.RNA

d.脂质

7.Southernblotting技术中，探针用于检测哪种分子？

a.DNA

b.蛋白质

c.RNA

d.脂质

8.Northernblotting技术中，探针用于检测哪种分子？

a.DNA

b.蛋白质

c.RNA

d.脂质

答案及解题思路：

1.答案：d.DNAsequencing

解题思路：DNA测序技术直接测定DNA的碱基序列，因此主要用于DNA序列测定。

2.答案：c.作为DNA合成的起点

解题思路：PCR反应中，引物是一段与模板DNA互补的短核苷酸序列，它们作为DNA合成的起点，引导DNA聚合酶开始复制过程。

3.答案：d.以上都是

解题思路：限制性内切酶具有特异性，能够识别并切割特定的DNA序列，且只能切割双链DNA。

4.答案：c.质粒

解题思路：在转基因技术中，质粒是最常用的载体，因为它们可以自主复制并转移至宿主细胞。

5.答案：b.降解目标mRNA

解题思路：RNA干扰技术中，siRNA通过与目标mRNA结合，导致其降解，从而抑制特定基因的表达。

6.答案：b.蛋白质

解题思路：Westernblotting技术用于检测蛋白质，通过特异性抗体识别和结合目标蛋白质。

7.答案：a.DNA

解题思路：Southernblotting技术用于检测DNA，通过探针与目标DNA序列结合。

8.答案：c.RNA

解题思路：Northernblotting技术用于检测RNA，通过探针与目标RNA序列结合。

二、填空题

1.DNA聚合酶的活性受到温度和dNTP的浓度的调控。

2.限制性内切酶的识别序列通常由4至6个核苷酸组成。

3.在基因克隆中，常用的克隆载体是质粒。

4.转基因技术中，将外源基因导入宿主细胞的方法有显微注射、电穿孔等。

5.RNA干扰技术中，siRNA通过RNA诱导的沉默复合物（RISC）机制降解目标mRNA。

6.Westernblotting技术中，抗体特异性结合目的蛋白。

7.Southernblotting技术中，探针与目的DNA片段序列互补结合。

8.Northernblotting技术中，探针与目的RNA片段序列互补结合。

答案及解题思路：

答案：

1.温度；dNTP的浓度

2.4至6

3.质粒

4.显微注射；电穿孔

5.RNA诱导的沉默复合物（RISC）

6.目的蛋白

7.目的DNA片段

8.目的RNA片段

解题思路：

1.DNA聚合酶的活性受多种因素影响，其中温度和dNTP的浓度是最基本的调控因素。温度影响酶的构象，而dNTP的浓度直接影响DNA合成的速度。

2.限制性内切酶识别序列的长度通常较短，但足够保证其特异性识别特定的核苷酸序列。

3.质粒因其易于操作和复制，是基因克隆中最常用的克隆载体。

4.显微注射和电穿孔是两种常见的转基因技术，它们分别通过物理方法将外源基因导入细胞。

5.siRNA通过RISC复合物识别并结合目标mRNA，引发其降解，从而实现基因沉默。

6.Westernbl