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复习班生物二轮复习专题三实验与探究
观察类实验〔6个〕
一.观察DNA和RNA在细胞中的分布
1.实验原理
(1)甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同eq\o(――→,\s\up7(用甲基绿、吡罗红混),\s\do5(合染色剂将细胞染色))
显示DNA和RNA在细胞中的分布
(2)盐酸:改变细胞膜的通透性―→加速染色剂进入细胞;使染色质中的DNA与蛋白质别离―→有利于DNA与染色剂结合。
2.实验流程
4个注意问题
(1)选材:口腔上皮细胞、无色的洋葱鳞片叶内表皮细胞,不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞,以防止颜色的干扰。
(2)用缓水流的目的:防止载玻片上的细胞被冲走。
(3)几种试剂在实验中的作用
①0.9%的NaCl溶液(生理盐水):保持口腔上皮细胞正常形态。
②8%的盐酸:a.改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;b.使染色质中DNA与蛋白质别离,有利于DNA与染色剂结合。
③蒸馏水:a.配制染色剂;b.冲洗载玻片。
④吡罗红甲基绿染液:混合使用,且现用现配。
(4)DNA和RNA在细胞核和细胞质中均有分布,只是量的不同,故结论中强调“主要”而不能说“只”存在于细胞核或细胞质中。
【即时稳固】
(2014·长沙市模拟)以下图表示观察DNA和RNA在细胞中的分布实验根本实验步骤,对该实验根本步骤的表达错误的选项是()
A.①表示制片,首先应在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液
B.②表示解离,需要用质量分数8%的盐酸处理烘干后的装片
C.③表示用缓水流冲洗,以免影响染色
D.④表示用甲基绿和吡罗红对标本先后进行染色
二.用显微镜观察多种多样的细胞
三.观察线粒体和叶绿体
1.实验原理
(1)观察叶绿体应选用富含叶绿体的藓类叶片或菠菜叶等。由于叶绿体本身含有色素,呈绿色,所以不需要染色。
(2)观察线粒体应选用动物或人体细胞,如人口腔上皮细胞。用健那绿染液染色,健那绿染液是专一性用于线粒体染色的活细胞染料,能将线粒体染成蓝绿色。
2.实验步骤
(1)叶绿体的观察:
低倍镜观察:在低倍镜下找到叶肉细胞
高倍镜观察:在高倍镜下,观察叶绿体的形态和分布情况
(2)线粒体观察:
制片
低倍镜观察:找到口腔上皮细胞
高倍镜观察:线粒体呈蓝绿色,细胞质接近无色
3.注意点5个
(1)观察叶绿体应选用细胞内叶绿体数量较少、体积较大、叶片薄的植物〔如苔藓类,黑藻,菠菜下表皮带叶肉细胞〕
(2)观察线粒体应选择无色细胞如口腔上皮细胞。不能选择含叶绿体的植物细胞,因为叶绿体的绿色会影响被染成蓝绿色的线粒体的观察。
(3)该实验要保持细胞的生活状态,临时装片随时保持有水状态。观察线粒体需染色。
(4)健那绿染液是专一性对线粒体染色的活体染料,可使活细胞中线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。
(5)线粒体和叶绿体的双层膜是电子显微镜下能看到而光学显微镜下看不到的结构。
【即时稳固】
(2014·宿州模拟)以下有关用高倍镜观察线粒体和叶绿体的实验说法不正确的选项是()
A.健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色
B.观察叶绿体时选用藓类的叶或黑藻的叶,原因是叶片薄而小,叶绿体清楚
C.用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉
D.可用高倍镜直接观察叶绿体和线粒体
四.观察植物细胞的质壁别离和复原
1.实验原理
成熟的植物细胞构成渗透系统可发生渗透作用。
2.质壁别离与复原实验流程
细胞质壁别离及复原有关的5个总结
(1)实验材料的选择〔紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞、黑藻叶肉细胞〕
①一般不选择细菌细胞,它能发生质壁别离,但现象不明显。
②不能选择动物细胞,它无细胞壁,不能发生质壁别离现象。
(2)实验试剂使用
①使用浓度过高的蔗糖溶液(0.5g/mL),质壁别离现象明显,但不能复原,因为溶液浓度过高,细胞过度失水而死亡。
②使用质量浓度为1mol·L-1的KNO3溶液,因为K+和NOeq\o\al(-,3)可被细胞吸收,使细胞液浓度增大,所以细胞先发生质壁别离后又自动复原(尿素、甘油、乙二醇等现象同上)。
(3)发生质壁别离时在细胞壁和细胞膜之间充满的是外界溶液,原因是细胞壁具有全透性。
(4)质壁别离与复原过程中水分移动是双向的,总结果是单向的。
(5)本实验用显微镜观察了三次,第一次与第二次形成对照,第三次与第二次形成对照,该对照方法为自身对照。
4.质壁别离实验的拓展应用
(1)判断成熟植物细胞是否有生物活性
(2)测定细胞液浓度范围
(3)比拟不同植物细胞的细胞液浓度(4)比拟未知浓度溶液的浓度大小
(5)鉴别不同种类的溶液(如KNO3和蔗糖溶液)
【即时稳固】
(2014·
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