蛋白质的生物合成 (3).ppt

TheShine-DalgarnosequenceofthemRNApairswithasequencenearthe3′endofthe16SrRNA.P位对准起始密码子AUG第30页，共65页，星期日，2025年，2月5日起始全过程注意mRNA与起始氨酰-tRNA进入的先后顺序!（1）起始因子IF3使70S亚基解离，与30S亚基结合形成30S?mRNA?IF3复合体，30S亚基上的部分P位对准起始密码子AUG。（2）起始氨酰tRNA(fmet-tRNAfMet)，和IF2、GTP结合，进入30S亚基P位，形成一大复合体。（3）70S起始复合物的形成第31页，共65页，星期日，2025年，2月5日3.肽链的延长：进位→转肽→移位需要：70S的起始复合物氨酰-tRNA三种延伸因子：EF-Tu、EF-Ts、EF-G（转位因子）GTP、Mg2+、K+第32页，共65页，星期日，2025年，2月5日进位Ts循环进入A位!第33页，共65页，星期日，2025年，2月5日转肽肽基转移酶催化反应的实质是使一个酯键转变成了一个肽键第34页，共65页，星期日，2025年，2月5日移位需要移位因子EF-G的参与和由一个GTP水解提供能量。第35页，共65页，星期日，2025年，2月5日4.终止与释放：1）释放因子RF(releasefactor)进入A位，识别终止密码子。2）释放因子使肽基转移酶的催化作用转变为水解作用，使肽链从tRNA上分离出来，生成一条多肽链，即新合成的蛋白质分子。3）在RRF因子(ribosomerecyclingfactor)参与下，tRNA、mRNA离开核糖体。第36页，共65页，星期日，2025年，2月5日释放因子（releasefactor,RF）RF1识别UAA、UAGRF2识别UAA、UGARF3是一种和GTP形成复合体的结合蛋白，能刺激RF1、RF2的活性？第37页，共65页，星期日，2025年，2月5日蛋白质合成所需的能量4形成一个肽键需要：1GTP→GDP+Pi核糖体的移位1GTP→GDP+Pi肽链的延长1GTP→GDP+Pi肽链的起始2ATP→AMP+PiAA活化起始复合物形成后，多肽链中每形成一个肽键需要4个高能磷酸键第38页，共65页，星期日，2025年，2月5日原核生物蛋白质合成的特点原核生物起始密码除AUG外，还有GUG，UUG合成起始需要起始密码子前的SD序列肽链的合成是在A位进行的肽链的合成方向是N端→C端mRNA的阅读方向是5`→3`转录与翻译是偶联的为提高效率，多个核糖体同时翻译一个mRNA分子每延长一个AA残基需要消耗4个高能磷酸第39页，共65页，星期日，2025年，2月5日原核生物转录与翻译偶联第40页，共65页，星期日，2025年，2月5日多核糖体翻译过程中，在细胞内一条mRNA链上结合着多个核糖体，甚至可多到几百个，构成多核糖体(polyribosome)，形成念珠状。这种多核糖体可以在一条mRNA链上同时合成多条相同的多肽链，这就大大提高了翻译的效率。第41页，共65页，星期日，2025年，2月5日真核生物与原核生物蛋白质合成的差异真核生物起始密码只有AUG，由Met-tRNAiMet识别；起始因子eIF约有9~10种；真核生物40S亚基与5’-Cap接触沿mRNA寻找AUG，无需SD序列信号；起始需GTP、ATP；起始复合物形成：Met-tRNAiMet先与40S亚基形成43S，再与mRNA结合成48S，最后与60S亚基结合成80S；延长因子：EF-T1、EF-T2；释放因子：eRF，对三个终止密码子都能识别。eucaryote第42页，共65页，星期日，2025年，2月5日5.多肽链的折叠与加工1）新生多肽链的折叠分子伴侣折叠酶分子伴侣与处在不稳定、非天然构象状态的蛋白质结合，主要是通过保护暴露到溶剂中的蛋白质疏水表面，以及通过一种可控的方式释放出被其结合的多肽链，从而促进多肽链正确地折叠。折叠酶的作用是加快折叠过程中特异性的步骤。第43页，共65页，星期日，2025年，2月5日2）蛋白质翻译后的修饰加工N末端的甲酰甲硫氨酸（fMet）或甲硫氨酸（Met）的去除蛋白质前体中不必要肽段的切除对多肽链中特定氨基酸侧链