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光谱细胞术和常规流式的比较

文章背景：

ReferenceEvaluatingspectralcytometryforimmuneprofilinginviraldisease

CytometryPARTA杂志（定量单细胞分析杂志），收录了采用定量单细胞测量、分离、操作和建模技术的创新科

学研究的原创研究报告和评论，以及通过单细胞技术获得的分子和细胞功能机制的原创文章。

一、实验背景

在传统的荧光细胞术中，通过使用宽带通滤光器，在目标检测器中测量面板中存在的每个荧光团。相比之下，光谱

细胞术使用大量带有窄带通滤波器的检测器来测量光谱中荧光团的信号，从而为每个荧光团解析更详细的荧光特征。

光谱方法在增加面板设计的灵活性和改进荧光信号的测量方面显示出前景。然而，很少有人报告传统和光谱系统之

间的数据比较。因此，作者试图将现代传统细胞仪系统与现代光谱系统进行比较，并从流式细胞仪用户的角度评估所得

数据集的质量。

结论：光谱细胞术方法与传统细胞术上的数据几乎一致，然而大量的检测器和光谱分离方法的集成提供了许多潜在

的优势。

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二、光谱流式与常规流式的原理比较

图1.488nm蓝色激光激发两个荧光团，PE和PE/CF594

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图2.BV711染色的补偿珠在采集后常规流式和光谱流式结果

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1）光谱流式具有大量窄带通特性的探测器，尽可能多地测量荧光团的整个发射光谱，而不是在具有宽带通特性的

单个探测器中测量峰值发射。

2）光谱流式可以确定单个样本中细胞自发荧光的特征，从而可以将自发荧光从受影响的通道中分离出来，并将自

发荧光的测量作为一个附加特征。

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三、常规流式和光谱流式的染色比较

图3.常规流式和光谱流式之间的荧光信号CV比较

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1）结果显示两种检测方式荧光信号CV相似，表明信号质量相似。

四、常规流式和光谱流式的信号扩散和分辨率比较

图4.信号扩散和分辨率的计算方式

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图5.常规流式和光谱流式的信号扩散和分辨率比较