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生物化学实验室操作技能考试卷

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1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。

2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。

一、选择题

1.生物化学实验中常用的酸碱指示剂有哪些？

A.石蕊

B.甲基橙

C.紫色石蕊

D.溴酚蓝

E.酚酞

2.生物化学实验中，常用于分离蛋白质的层析方法有哪几种？

A.等电聚焦层析

B.凝胶过滤层析

C.色谱层析

D.水洗层析

E.以上都是

3.蛋白质变性通常与哪些因素有关？

A.高温

B.强酸或强碱

C.尿素

D.重金属离子

E.以上都是

4.什么是生物化学实验中的SDSPAGE？

A.离子交换层析

B.疏水性层析

C.聚丙烯酰胺凝胶电泳

D.离子层析

E.以上都不是

5.红细胞吸水涨破的现象称为什么？

A.红细胞溶血

B.红细胞破裂

C.红细胞裂解

D.红细胞胀破

E.以上都是

6.胺类物质在酸性条件下与重氮盐反应，可什么产物？

A.重氮化合物

B.噁唑化合物

C.酚类化合物

D.胺类化合物

E.偶氮化合物

7.什么是氨基酸的等电点？

A.氨基酸溶液的酸碱度

B.氨基酸溶解度最高的pH值

C.氨基酸开始带正电荷的pH值

D.氨基酸开始带负电荷的pH值

E.氨基酸两性解离的点

8.红细胞吸水涨破实验中，为什么要先加生理盐水再加入蒸馏水？

A.为了保护红细胞不被破坏

B.为了模拟生理状态下的红细胞环境

C.为了观察红细胞在不同溶液中的变化

D.为了方便实验操作

E.以上都是

答案及解题思路：

1.答案：B、D、E

解题思路：石蕊、甲基橙、溴酚蓝和酚酞是常用的酸碱指示剂。

2.答案：E

解题思路：等电聚焦层析、凝胶过滤层析、色谱层析、水洗层析都是常见的蛋白质分离层析方法。

3.答案：E

解题思路：高温、强酸或强碱、尿素、重金属离子等因素都可以导致蛋白质变性。

4.答案：C

解题思路：SDSPAGE是聚丙烯酰胺凝胶电泳，用于蛋白质的分子量测定。

5.答案：A

解题思路：红细胞吸水涨破的现象称为溶血，是指红细胞膜破裂，内容物释放到外界环境中。

6.答案：E

解题思路：胺类物质在酸性条件下与重氮盐反应，偶氮化合物。

7.答案：E

解题思路：氨基酸的等电点是指氨基酸在溶液中不带净电荷的pH值，即两性解离的点。

8.答案：E

解题思路：先加生理盐水再加入蒸馏水是为了模拟生理状态下的红细胞环境，同时保护红细胞不被破坏，并方便观察红细胞在不同溶液中的变化。

二、填空题

1.在生物化学实验中，缓冲溶液的主要作用是维持溶液的pH值稳定。

2.红细胞吸水涨破实验中，红细胞在蒸馏水中的渗透压是0。

3.蛋白质变性后的溶液通常会出现浑浊现象。

4.蛋白质分子中的疏水侧链在非极性环境下倾向于聚集在一起。

5.胺类物质与重氮盐反应的是偶氮化合物。

6.在SDSPAGE实验中，蛋白质分子在凝胶中泳动的速率取决于分子的大小和形状。

7.氨基酸在酸性条件下的质子化程度取决于其pKa值。

8.蛋白质在生物化学实验中常用的定量方法有紫外分光光度法、电泳法、沉淀法等。

答案及解题思路：

1.答案：维持溶液的pH值稳定。

解题思路：缓冲溶液由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸组成，能够抵抗外界酸碱的加入，保持溶液的pH值稳定。

2.答案：0。

解题思路：在红细胞吸水涨破实验中，蒸馏水为低渗透压溶液，红细胞吸水膨胀直至破裂，因此红细胞在蒸馏水中的渗透压为0。

3.答案：浑浊现象。

解题思路：蛋白质变性后，其溶解度降低，容易形成沉淀，导致溶液浑浊。

4.答案：非极性环境。

解题思路：疏水侧链是蛋白质分子中的非极性部分，在非极性环境中，疏水侧链容易聚集在一起。

5.答案：偶氮化合物。

解题思路：胺类物质与重氮盐反应偶氮化合物，这是有机合成中常见的一种反应。

6.答案：分子的大小和形状。

解题思路：SDSPAGE实验中，蛋白质分子在凝胶中泳动速率与分子大小和形状有关，分子越大，泳动速率越慢。

7.答案：pKa值。

解题思路：氨基酸的质子化程度与其pKa值有关，pKa值越小，质子化程度越高。

8.答案：紫外分光光度法、电泳法、沉淀法等。

解题思路：这些方法在生物化学实验中广泛用于蛋白质的定量分析。紫外分光光度法基于蛋白质对紫外光的吸收特性；电泳法根据蛋白质分子大小和电荷差异进行分离；沉淀法利用蛋白质与其他物质结合形成沉淀的性质进行定量。

三、判断题

1.生物化学实验中，所有的蛋白质都可以通过SDSPAGE进行分离。（