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血清浆葡萄糖测定BASICCLINICALLABORATO.pptx

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血清(浆)葡萄糖测定BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE1

1标本采集与处理空腹静脉血随机静脉血毛细血管全血至少8小时无热量摄入,用于测空腹血糖不受是否空腹影响,用于随机血糖测定用于便携式血糖仪床旁检验标本采集

1标本采集与处理采集1分离2保存3不同的检测目的按要求采集标本采集1小时内分离血清或血浆血浆标本选用能抑制糖酵解的含氟化钠成分的抗凝剂检测或2-8℃低温保存更长久(3天以上)标本处理

2测定方法按测定方法原理分类Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等无机化学法有机化学法特异性差干扰因素多试剂有腐蚀性,致癌性酶法GOD-POD法(常规)HK法(参考)GDH法准确度、精密度、灵敏度好,适用于全自动生化仪

2测定方法葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸内酯+H2O2

2H2O2+4-氨基安替比林+酚POD红色醌类化合物

红色醌类化合物在505nm有吸收峰,其吸光度增加在一定范围内与标本中的葡萄糖浓度成正比。原理1.葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法)

2测定方法1.操作简单,特异性较高,是血糖测定的首选方法。2.GOD-POD法,其准确度和精密度都能达到临床要求,操作简便,可用于自动生化仪。是我国临检中心目前推荐的常规方法。3.GOD仅对β-葡萄糖高度特异性,对α-葡萄糖作用弱。延长孵育可使其变旋。4.POD特异性较低,还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素和谷胱甘肽等可消耗H2O2,引起负误差(测定结果偏低)。但血液中上述物质浓度不高,对血糖测定影响不大。具有氧化剂作用的化合物参与反应,则可引起正误差。5.严重溶血、脂血标本对结果有影响,干扰比色测定方法学评价

2测定方法2.己糖激酶法(HK法)原理方法学评价葡萄糖+ATPHK葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADP+G-6-PD6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH

NADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中葡萄糖浓度成正比本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较昂贵。

2测定方法3.葡萄糖脱氢酶法(GDH法)原理方法学评价(1)GDH对葡萄糖具有高度特异性,其测定结果与HK法具有良好的一致性(2)一般浓度的抗凝剂或防腐剂及血浆中其他物质不干扰测定。但当血胆红素≥342μmol/L和血红蛋白≥1g/L时,可使测定浓度分别增高0.72mmol/L和0.22mmol/L。脂血标本会干扰测定,故须做标本对照管NADH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中葡萄糖浓度成正比

3参考区间空腹血糖3.9-6.1mmol/L随机血糖肾糖阈<7.8mmol/L8.9mmol/L

4临床意义生理性高血糖:饮食性(高糖饮食)情感性(情绪激动)高血糖症:空腹血糖>7.0mmol/L病理性高血糖:糖尿病内分泌性疾病应激性高血糖脱水致血液浓缩1.血糖增高

4临床意义空腹性低血糖*长期饥饿、剧烈运动*内分泌疾病致胰岛素分泌绝对或相对过量*严重肝脏疾病*抗胰岛素的激素不足反应性低血糖功能性低血糖*2型DM或糖耐量受损伴低血糖*营养性低血糖*低血糖2.血糖降低

4临床意义3.药物影响噻嗪类利尿药口服避孕药儿茶酚胺肾上腺素等降糖药抗组胺药酒精普萘洛尔等引起血糖升高的药物引起血糖降低的药物

课堂测验1.下列关于GOD-POD法测血清葡萄糖不正确的是(多选题):A.该方法为国内推荐的参考方法B.血中尿酸、维生素C过高,易导致假阳性结果C.该方法仅对β-葡萄糖高度特异性,对α-葡萄糖基本无作用D.该法比色分析是基于Trinder反应生成醌类化合物,其比色波长多选用340nm正确答案:ABD

课堂测验2.血浆葡萄糖测定最常用的抗凝剂是:A.EDTAB.氟化钠-肝素钠C.草酸钾-氟化钠D.草酸钾-叠氮钠正确答案:C

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