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CompanyLogoCompanyLogoLOGOChinaPharmaceuticalUniversity色谱定性定量分析方法CompanyLogo色谱分析方法验证色谱定量分析方法联用技术定性方法色谱定性分析方法一、色谱定性分析方法CompanyLogo保留时间tr01保留指数I04相对保留时间RRT，t/tr02相对保留值α,(t-t0)/(tr-t0）03广泛用于药物中的杂质、体内外代谢产物的结构鉴定光谱能提供丰富的结构信息，但是对分析物纯度较高。色谱高分离能力，但鉴别结构的能力较弱。二、色谱-光谱联用技术定性气相色谱-质谱联用01多用于分离易挥发、热稳定、极性小的化合物02GC-MS：采用EI离子源。EI：获得分子离子峰及丰富的分子结构信息；03分离对象较广LC-MS：采用API离子源;一级质谱获得分子量信息；高裂解电压（CID）或二级质谱（MS/MS）获得分子结构信息。液相色谱-质谱联用CompanyLogo例：盐酸乙哌立松片主要降解产物的定性鉴别

供试品溶液的LC-UV图鉴定要点：1、利用LC-UV选择最佳LC分离条件，并确定主峰与降解产物的峰位；选择合适的离子源，利用LC-MS获得杂质的准分子离子峰。LC-ESI-MS的总离子流色谱图LC-APCI-MS的总离子流色谱图030201获得降解产物准分子离子峰的裂解信息。方式一：在APCI条件下采用较高的CID电压或二级质谱裂解m/z175.3，获得碎片信息；方式二：在GC-MS(EI)质谱获得分子离子峰及其裂解途径；利用原药的质谱裂解途径确定降解产物的可能结构；1杂质YJ的结构2APCIEI联用技术定性鉴定规律CompanyLogo分析物质结构，确定色谱分离模式；以常用检测器（GC:FID/LC:UV）为手段，优化色谱分离条件，确定待鉴定组份峰位；根据化合物结构，选用合适的光谱技术鉴定；依据光谱信息进行结构鉴定：根据质谱提供的分子量和分子碎片信息，结合原药的光谱信息初步推断未知物结构；三、色谱定量分析方法CompanyLogo色谱信号的测量:色谱峰峰高与峰面积反映检测器对样品的响应值，定量分析中峰面积更为常用；定量分析的方法面积归一化法；外标法；内标法；标准曲线法不同检测器的色谱信号与物质浓度关系FID、ECD、UV检测器的响应（峰面积）与样品的浓度呈线性关系；ELSD响应的自然对数与样品的浓度或质量呈线性关系；质谱（MS-ESI）检测器高浓度时的响应与样品的质量可能呈二次或更复杂的方式。四、色谱分析方法验证CompanyLogo01040203目的：证明所采用的色谱分析方法适合于相应的检验要求，判断能否用于药品分析。效能指标：评价分析方法的尺度效能指标包括:精密度、准确度、专属性、检测限、定量限、线性与范围、耐用性、稳定性、系统适用性等药品质量标准分析方法验证药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则药物稳定性试验指导原则缓释、控释制剂指导原则不同分析测定方法的要求0102专属性（specificity）:意义：指有其他成分可能存在情况下，采用的方法能准确测定出被测物的特性。内容：药物制剂含量测定时的专属性考察内容：杂质中间体与主成份的分离情况；破坏性试验产生的降解产物与主成份的分离情况：酸、碱、热、氧化、光破坏辅料是否干扰测定。准确度（accuracy）：意义：测量值与真实值接近的程度。药物制剂的含量测定以回收率表示。12345一般在期望浓度的80%、100%、120%三个水平量，各测定三次，回收率均值在98-102%。内容：即通过在空白基质中加入已知量不同浓度的对照品，比较测定值和加入值确定。CompanyLogoCompanyLogoLOGO