飞蝗保幼激素酯酶的鉴定和功能研究.pdf

中文摘要

juvenilehormoneJH

保幼激素（，）是由昆虫咽侧体分泌的倍半萜类衍生物激素，

Locustamigratoria

能够调控昆虫变态、繁殖和滞育等过程。飞蝗（）是危害重大的农

作物害虫，存在群居型和散居型两种类型。散居型向群居型飞蝗的转变是造成蝗灾

JHJH

的一个重要因素，而在调控飞蝗的两型转变中发挥着重要作用，因此明确飞蝗

juvenilehormoneesterase

代谢途径能为飞蝗防控提供一定理论依据。保幼激素酯酶（，

JHE）是昆虫主要的JH代谢酶之一，而目前对直翅目昆虫保幼激素酯酶的研究尚不

完善。因此本研究以飞蝗为研究对象，探究保幼激素酯酶基因在飞蝗生长发育中的

功能。本文研究的内容及结果如下：

一、基于飞蝗转录组基因注释结果，搜寻到五个飞蝗候选LmJHE基因，经蛋白

序列比对发现它们与蟋蟀GaJHE的相似性在43.53%-51.20%之间，并且具备JHE的

五个特征蛋白基序。接着采用实时荧光定量PCR技术检测它们在四龄若虫不同天数

的表达水平，发现LOCMI15548和LOCMI15625在四龄若虫表达逐渐升高，与四龄

JHJH

若虫滴度逐渐下降的趋势呈负相关，而其它基因表达变化与滴度变化无明显

LOCMI15548LOCMI15625

对应关系。另外基因组织表达分析发现和在四龄若虫脂

肪体高表达，与其它昆虫JHE脂肪体高表达特征类似。因此经上述筛选过程

LOCMI15548LOCMI15625LmJHE

和被初步判定为飞蝗候选基因。

LOCMI15548LOCMI15625JHE

二、为了进一步明确和是否具备生理功能，本

研究通过RNA干扰（RNAi）技术对二者进行功能研究。结果显示：注射双链RNA

dsRNALOCMI15548LOCMI156250.380.24

（）后，和分别下降为对照的和倍。接

JHLOCMI15548

着用酶联免疫吸附法测定了基因沉默后滴度变化，发现在飞蝗四龄

若虫沉默48和96小时后，JH滴度显著升高为对照的1.19倍和1.53倍，而

LOCMI15625JHLOCMI15548

沉默后飞蝗滴度无明显变化。另外在四龄沉默后蜕皮

8.33%27.78%

时间发生延迟，并且在蜕变为五龄和成虫后分别有