花药与花粉培养.ppt

关于花药与花粉培养第1页，共32页，星期日，2025年，2月5日第一节概述图8.1花药（A）和花粉（P）培养的雄核发育和单倍体植株的各种方式图解第2页，共32页，星期日，2025年，2月5日第二节小孢子的形成和花粉的发育途径一、小孢子的正常发育二、花药培养时花粉发育途径1营养细胞发育途径（A型）2生殖细胞发育途径3营养细胞和生殖细胞并进发育途径4花粉均等分裂途径第3页，共32页，星期日，2025年，2月5日一、小孢子的正常发育第一期:四分孢子形成期第二期:单核期特点：特化的细胞壁逐渐形成。可分为：单核早、中、晚（靠边）第三期：双核期第四期：三核期第4页，共32页，星期日，2025年，2月5日二、花药培养时花粉发育途径1、营养细胞发育途径（A型）花粉生殖核（小）------不分裂或分裂几次后退化营养核（大）-----经多次分裂而形成多细胞团，并迅速增殖而突破花粉壁，细胞持续分裂形成类胚体或愈伤组织，最后形成单倍体植株常见的植物：烟草、大麦、光叶曼陀罗、小麦、小黑麦和辣椒第5页，共32页，星期日，2025年，2月5日2、生殖细胞发育途径只在天仙子中出现完全不再分裂只分裂有限几次即停止营养细胞生殖细胞多次分裂多细胞团发育愈伤组织胚状体单倍体植株第6页，共32页，星期日，2025年，2月5日3、营养细胞和生殖细胞并进发育途径营养细胞多次分裂大的多细胞团生殖细胞多次分裂小的多细胞团同时发育愈伤组织胚状体单倍体植株只见于南洋金花中DNA复制两种营养核发生融合发育2n、3n或4n胚状体有两种情况12第7页，共32页，星期日，2025年，2月5日4、花粉均等分裂途径这个途径在南洋金花中相当普遍生殖细胞多次分裂多细胞团发育愈伤组织胚状体单倍体植株营养细胞花粉均等分裂营养核生核核第8页，共32页，星期日，2025年，2月5日第三节花药培养概念：花药培养（antherculture）：指用无菌操作技术将成熟或未成熟的花药接种在人工培养基上，诱导花粉单性发育形成植株的过程。第9页，共32页，星期日，2025年，2月5日一、花药培养的一般操作程序1.培养基的选择2.材料选取3.材料预处理4.材料消毒5.接种6.脱分化培养7.再分化培养8.花粉植株移植9.染色体加倍第10页，共32页，星期日，2025年，2月5日1.培养基的选择NitschH、MS被广泛用于双子叶植物的花药培养。B5：被广泛用于十字花科及豆科植物的花药培养。禾谷类植物的花药培养，早期多采用Miller培养基、MS培养基、N6培养基和马铃薯2号培养基。Sunderland(1984)设计了C17培养基，用于水稻、小麦、大麦、小黑麦、黑麦、玉米和甘蔗等禾谷类作物的花药培养。第11页，共32页，星期日，2025年，2月5日2.材料选取植物种减数分裂中期减数分裂晚前期四分体单核期双核期成熟期水稻小麦玉米油菜大麦番茄茄子辣椒拟南芥菜甘蓝苹果葡萄烟草小黑麦小黑麦×羊茅杨树00000000000000000000不同植物花药培养的合适花粉发育时期第12页，共32页，星期日，2025年，2月5日3.材料预处理低温：高温生长素其他方法处理常能提高愈伤组织和苗分化的频率。第13页，共32页，星期日，2025年，2月5日4.材料消毒取回的材料，在接种前进行表面灭菌，一般用70～75％酒精，将表面擦洗即可。第14页，共32页，星期日，2025年，2月5日5.接种在无菌接种室或超净工作台上进行接种操作，采用直径3cm的试管，每管接种花药30～60粒。必须注意：在操作过程中，不应使花药受到损伤，因为损伤常常会刺激花药壁形成二倍体的愈伤组织。损伤的花药要淘汰。第15页，共32页，星期日，2025年，2月5日6.脱分化培养根据材料不同，选取适宜的基本培养基、适当的生长素比例和最适的温度进行培养，经10～30天可诱导愈伤组织形成。第16页，共32页，星期日，2025年，2月5日7.再分化培养愈伤组织增殖到1～3mm大小时，应及时进行再分化培养以获得花粉植株。要选择含适当激素