生物化学仪器分析紫外.pptx

10:15上午;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;165nm;11十月2020;饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*，n→σ*跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。

不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*，π→π*跃迁，吸收峰一般大于200nm。

;11十月2020;11十月2020;11十月2020;9.有机化合物的吸收带;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;165nm;异环（稠环）二烯母体：

?max=217nm

同环（非稠环或稠环）二烯母体：

?max=253nm

ni?I:由双键上取代基种类和个数决定的校正项;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;.立体结构和互变结构的影响;11十月2020;.溶剂的影响;.溶剂的影响;11十月2020;10:15:38;;10:15:38;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;温度对DNA的紫外吸收有明显的影响。在温度为70°C以下，DNA以双链形式存在，因此紫外吸收相对较低。

在70～85°C时，温度对DNA的紫外吸收具有显著的影响。

85°C以后，温度的增加对DNA紫外吸收的影响很弱，这是由于在85°C以上，DNA以单链形式存在，紫外吸收接近最大值。

变性温度(meltingtemperature，Tm)是指双链DNA分离成两个单链DNA时对应的温度。这一特性对DNA的分离分析非常重要。如PCR的设计就是基于DNA的变性温度的基础。;§3.1.6影响UV－Vis分析的因素：

【1】温度

;;这些显色反应，必须满足以下条件：

;影响显色反应的因素：

【1】．酸度

显色反应最适宜的酸度范围可通过实验来确定：测定某一固定浓度的试样的吸光度随酸度的变化，以吸光度为纵坐标，溶液的PH值为横坐标作图。;;参比溶液的选择视分析体系而定，具体有：

1】．溶剂参比试样简单、共存其它成分对测定波长吸收弱，只考虑消除溶剂与吸收池等因素；

;3】．试剂参比如果显色剂或其它试剂在测定波长有吸收，按显色反???相同的条件，不加入试样，同样加入试剂和溶剂作为参比溶液。

;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;代入朗伯-比尔定律有：

Δc/c=0.4343ΔT/TlgT

要使测定的相对误差Δc/c最小，求导取极小得出：

lgT=-0.4343=A

即当A=0.4343时，吸光度测量误差最小。;测定方法

;1校准曲线法;【2】标准对比法

即将待测溶液与某一标样溶液，在相同的条件下，测定各自的吸光度，建立朗伯-比尔定律，解方程求出未知样浓度与含量。

;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;11十月2020;解：A只有孤立双键，其?→?*跃迁?max在200nm以下。因图中

（Ⅰ）?max〈200nm，故（Ⅰ）为化合物A。

B的?max可以计算：基本值253nm

两个环外双键（2×5）10nm

+)4个－R(4×5)20nm;1.蛋白质的分析

2.核酸的分析

3.微生物代谢产物