2025届高考生物二轮复习：专题九+基因工程+.docx

专题九4.基因工程

1～6题每题7分，7～9题每题8分，共66分。

1．(2024·江西，12)γ-氨基丁酸在医药等领域有重要的应用价值。利用L-谷氨酸脱羧酶(GadB)催化L-谷氨酸脱羧是高效生产γ-氨基丁酸的重要途径之一。研究人员采用如图方法将酿酒酵母S的L-谷氨酸脱羧酶基因(gadB)导入生产菌株E.coliA，构建了以L-谷氨酸钠为底物高效生产γ-氨基丁酸的菌株E.coliB。下列叙述正确的是()

A．图示表明，可以从酿酒酵母S中分离得到目的基因gadB

B．E.coliB发酵生产γ-氨基丁酸时，L-谷氨酸钠的作用是供能

C．E.coliA和E.coliB都能高效降解γ-氨基丁酸

D．可以用其他酶替代NcoⅠ和KpnⅠ构建重组质粒

2．(2024·浙江强基联盟高三联考)东南景天中的HMA3基因能编码Cd(镉)转运蛋白，Cd转运蛋白能将土壤中的Cd吸收进体内。现欲将东南景天中的HMA3基因转入栾树，以增强栾树对Cd的富集能力，从而有效治理Cd污染，科研人员利用图示结构构建重组DNA，图1为HMA3基因所在DNA示意图，图2为质粒结构示意图。下列叙述正确的是()

A．欲获取HMA3基因，可用引物1、引物2进行PCR循环至少2轮获得

B．用凝胶电泳鉴定PCR产物，引物1、引物2扩增的产物可得3条条带

C．构建含HMA3和GFP基因的重组质粒，需在引物上添加BglⅡ和HindⅢ的识别序列

D．用含潮霉素的培养基筛选受体细胞，能生长的为含重组质粒的受体细胞

3．由于PCR扩增出的目的基因末端为平末端，且无合适的限制酶识别序列，需借助中间载体P将目的基因接入载体E。图示为两种载体的结构和相关限制酶的识别序列，下列叙述正确的是()

A．构建重组载体P时，应选择EcoRⅤ进行酶切，再用T4DNA连接酶连接

B．为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶EcoRⅤ或SmaⅠ切割载体P

C．载体P不能作为基因表达载体，是因为它不含起始密码子和终止密码子

D．若受体细胞表现出抗性基因的相应性状，表明重组载体成功导入受体细胞

4．目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因为长度300bp的片段。下列有关说法错误的是()

A．PCR复性温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链

B．电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小和构象有关

C．选取引物甲、丙，扩增出450bp长度片段时，可以说明目的基因正接

D．选取引物甲、乙，扩增出400bp长度片段时，可以说明目的基因反接

5．普通棉花中β-甘露糖苷酶基因表达出的GhMnaA2能催化半纤维素降解，使棉纤维长度变短。为了培育长绒棉，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体(将正义GhMnaA2基因与载体反向连接)，获得了转基因长绒棉新品种，具体过程如图所示，图中SmaⅠ、NotⅠ、HindⅢ和BamHⅠ代表相应的酶切位点。用SmaⅠ和NotⅠ切割某正义表达载体可获得3kb、18kb、28kb、59kb4种长度的DNA片段。下列叙述正确的是()

A．正义GhMnaA2基因的转录方向是B→A

B．过程①得到的表达载体均为反义表达载体

C．反义GhMnaA2基因可能通过抑制GhMnaA2基因的翻译来保证棉纤维长度

D．用NotⅠ切割反义表达载体获得的DNA片段的长度为21kb和87kb

6．双向启动子可同时结合两个RNA聚合酶来驱动下游基因的表达，研究人员构建了图示表达载体，以检测双向启动子作用效果。下列分析不正确的是()

A．可用农杆菌转化法将构建好的表达载体导入植物细胞

B．为连入GUS基因，需用SalⅠ和SphⅠ酶切已整合了双向启动子及LUC基因的质粒

C．在培养基中添加壮观霉素可筛选出成功导入该表达载体的微生物受体细胞

D．可通过观察是否出现荧光和蓝色物质确认双向启动子的作用

7．研究人员将目的基因插入质粒，构建重组质粒的过程如图所示，再将该重组质粒导入大肠杆菌中。由β-半乳糖苷酶基因编码产生的β-半乳糖苷酶可分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈蓝色，否则菌落为白色。下列叙述错误的是()

A．将目的基因插入质粒中时，需要用到的酶有XhoⅠ、NheⅠ和DNA连接酶

B．需要用Ca2＋处理大肠杆菌，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态

C．按图示构建的重组质粒导入大肠杆菌后，大肠杆菌可正常表达该目的基因

D．在含X-gal的培养基上培养导入了重组质粒的大肠杆菌，可出现蓝色菌落

8．人类Y基因启动子上游的调控序列中含有