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实验二
细菌的简单染色与革兰氏染色;一、目的要求;二、根本原理;简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态，简单染色不能区分细菌细胞的构造。
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌〔G+〕和革兰氏阴性菌〔G-〕两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法，其是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。;革兰氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较;G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经沙黄复染后就成红色。
G?菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保存初染时的颜色。;三、实验器材;四、实验方法及步骤;;〔2〕晾干让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。
〔3〕固定手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定〔以不烫手为宜〕。
〔4〕染色将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上，加草酸铵结晶紫或者沙黄染色1-2min。
〔5〕水洗用水洗去涂片上的染色液。
〔6〕枯燥将洗过的涂片放在空气中晾干或用吸水纸吸干。
〔7〕镜检先低倍观察，再高倍观察，并找出适当的视野后，将高倍镜转出，在涂片上加香柏油一滴，将油镜头浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。;涂片;2、革兰氏染色;〔6〕媒染?滴加碘液，媒染1min；
〔7〕水洗?用水洗去碘液；
〔8〕脱色?将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20-25s至流出液无色，立即水洗；
〔9〕复染?滴加沙黄复染5min；
〔10〕水洗?用水洗去涂片上的沙黄染色液；
〔11〕晾干?将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干；
〔12〕镜检?镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反响性。;;五?本卷须知;六思考题及作业题;球菌;杆菌;革兰氏阴性菌
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