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分子生物学导论
课程大纲第一部分:分子生物学基础介绍分子生物学的基本概念、发展历史、研究对象和方法。重点讲解DNA和RNA的结构、功能以及复制、转录和翻译等中心法则过程。第二部分:基因表达调控深入探讨原核生物和真核生物的基因表达调控机制,包括转录调控、RNA加工与剪接、遗传密码以及翻译后修饰等重要环节。第三部分:基因工程与应用
分子生物学的发展历史1早期探索(19世纪末至20世纪初)孟德尔遗传定律的发现为遗传学奠定了基础。米歇尔发现核酸,为后续研究提供了物质基础。2经典分子生物学时期(20世纪40年代至60年代)艾弗里证明DNA是遗传物质。沃森和克里克提出DNA双螺旋结构模型。克里克提出中心法则,阐述遗传信息的传递方向。3现代分子生物学时期(20世纪70年代至今)
分子生物学的研究对象和方法1研究对象分子生物学主要研究细胞内的生物大分子,包括DNA、RNA、蛋白质等,以及它们之间的相互作用和调控机制。也包括病毒等非细胞生命形式的分子机制。2研究方法常用的研究方法包括分子克隆、DNA测序、PCR技术、凝胶电泳、蛋白质印迹、免疫沉淀、细胞培养、显微镜技术等。生物信息学也日益重要,用于分析海量生物数据。研究意义
DNA结构与功能DNA结构DNA是由脱氧核糖、磷酸基团和含氮碱基(腺嘌呤A、鸟嘌呤G、胞嘧啶C、胸腺嘧啶T)组成的长链聚合物。两条DNA链通过碱基互补配对(A-T,G-C)形成双螺旋结构。DNA功能DNA是细胞内遗传信息的载体,储存着生物体生长、发育、繁殖所需的全部遗传信息。DNA通过复制将遗传信息传递给后代,通过转录和翻译指导蛋白质的合成。DNA稳定性DNA双螺旋结构和碱基互补配对保证了DNA的稳定性,使其能够长期储存遗传信息。细胞内存在多种DNA修复机制,可以修复DNA损伤,维持遗传信息的完整性。
DNA复制的基本原理半保留复制DNA复制时,双链解开,每条链作为模板,合成一条新的互补链。新合成的DNA分子由一条旧链和一条新链组成,称为半保留复制。复制起点DNA复制从特定的序列开始,称为复制起点。原核生物通常只有一个复制起点,真核生物有多个复制起点。复制方向DNA复制是双向的,从复制起点向两个方向延伸。复制叉是DNA复制的结构,位于复制起点两端,随着复制的进行而移动。
DNA复制的酶学DNA聚合酶DNA聚合酶是催化DNA合成的关键酶。它以DNA为模板,按照碱基互补配对原则,将dNTP聚合到新链上。DNA聚合酶具有校对功能,可以纠正复制错误。DNA解旋酶DNA解旋酶可以解开DNA双链,为DNA复制提供单链模板。它利用ATP水解的能量,破坏DNA双链之间的氢键。DNA连接酶DNA连接酶可以连接DNA片段,形成完整的DNA链。它催化磷酸二酯键的形成,连接相邻的DNA片段。
真核生物DNA复制的特点多个复制起点真核生物基因组庞大,DNA复制从多个复制起点同时开始,以提高复制效率。1端粒复制真核生物染色体末端存在端粒,端粒酶可以延长端粒,维持染色体的稳定性。2组蛋白组装真核生物DNA复制与组蛋白组装紧密偶联,新合成的DNA分子需要与组蛋白结合,形成染色质结构。3
DNA修复机制1跨损伤复制修复2同源重组修复3非同源末端连接4碱基切除修复5核苷酸切除修复DNA是遗传信息的载体,但易受各种因素的影响而发生损伤。细胞内存在多种DNA修复机制,可以修复DNA损伤,维持遗传信息的完整性。包括核苷酸切除修复、碱基切除修复、同源重组修复和非同源末端连接等。
RNA的种类和功能种类功能mRNA信使RNA,携带遗传信息,指导蛋白质合成。tRNA转运RNA,转运氨基酸,参与蛋白质合成。rRNA核糖体RNA,组成核糖体,参与蛋白质合成。ncRNA非编码RNA,参与基因表达调控等多种生物学过程。RNA是细胞内重要的生物大分子,种类繁多,功能各异。根据功能不同,RNA可分为信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)和非编码RNA(ncRNA)等。
转录的基本过程起始RNA聚合酶结合到DNA的启动子区域,解开DNA双链。延伸RNA聚合酶以DNA为模板,按照碱基互补配对原则,将NTP聚合到RNA链上。终止RNA聚合酶到达DNA的终止子区域,RNA链合成结束,RNA聚合酶从DNA上脱落。
原核生物转录调控1启动子启动子是RNA聚合酶结合的DNA序列,决定转录的起始位置和方向。原核生物启动子通常包含-10区和-35区两个保守序列。2操纵子操纵子是由启动子、操纵序列和一个或多个结构基因组成的DNA片段。操纵序列是阻遏蛋白结合的DNA序列,可以抑制转录的起始。3阻遏蛋白阻遏蛋白可以结合到操纵序列上,阻止RNA聚合酶结合到启动子上,从而抑制转录的起始。阻遏蛋白的活性受小分子物质的调控。
真核生物转录调控转录因子转录因子是与DNA特定序列结合的
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