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3.修饰(modification)如:G?m7G4.添加(addition)如添加帽子结构、尾巴结构、氨基酸臂等5.编辑(editing)1.剪接(splicing)2.剪切(cleavage)原核生物的mRNA通常没有转录后加工过程。原核生物rRNA和tRNA必须经历剪切和修饰加工过程2.真核生物启动子催化不同种类的RNA合成。真核生物RNA聚合酶的启动子有三种:I、II、III。对应各自的RNA聚合酶。RNA聚合酶II的启动子序列多样。RNA聚合酶II完成了hnRNA的合成作用。(1)帽子位点(capsite)01转录起始点区的通用序列为PyPyCAPyPyPy,其中A为转录起始点(+1),Py为嘧啶碱基。即在转录起始点A的两侧有多个嘧啶核苷酸。02真核RNA聚合酶II起始点序列特征与原核生物E.coli转录起始点的规律一致。(2)TATA框(TATAbox)又称基本启动子,在-30~-25区域,通用序列为TATA(A/T)A(A/T)。RNA聚合酶II与TATA框结合后才能启动转录过程。类似原核Pribnowbox。01启动子若缺乏TATA框,转录会在许多位点开始。 02保守序列为GG(C/T)CAATCT,一般位于-75附近。该序列可能与控制转录起始的效率有关。增强子是指能使和它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列,一般在-100以上的区域。有效的增强子可以位于基因的5’端,也可位于基因的3’端,有的还可位于基因的内含子中。大多为重复序列。原核生物转录的起始s因子与核心酶结合为RNA聚合酶的全酶s因子找到起始位点,RNA聚合酶与-35序列结合,即为“DNA-RNA聚合酶”的闭链式二元复合物RNA聚合酶向-10序列滑动,并牢固结合-10序列,在-10序列与起始点处发生局部解链,形成开链式二元复合物。在b亚基催化下形成RNA的第一个磷酸二酯键,形成了“DNA-RNA-RNA聚合酶”的三元复合物三元复合物形成并生成6-9个核苷酸后,σ亚基脱落,核心酶与DNA亲和力下降,有利于核心酶在DNA链上的滑动.σ亚基如果不脱落,转录无法进入延长阶段,并有可能导致转录流产。1三元复合物2转录的起始1RNA聚合酶全酶+启动子DNA处于双链状态2聚合酶全酶所结合的DNA序列中有一小段双链被解开3RNA聚合酶、DNA和新生RNA4共价地向生长RNA链的3’端添加核糖核苷酸RNA聚合酶是以5’?3’方向来延长RNA链RNA聚合酶本身沿着模板链以3’?5’方向移动RNA链的延长并非恒定速度进行,有延宕现象。DNA/DNA双链比DNA/RNA杂化双链稳定CA-TA-U转录空泡:即为延长阶段的“DNA-RNA-RNA聚合酶”三元复合体5?3?DNA原核生物转录过程中的羽毛状现象核糖体RNARNA聚合酶在同一DNA模板上,有多个转录同时在进行;转录尚未完成,翻译已在进行。这种形状说明:3.转录的终止终止子:提供终止信号的序列。转录终止信号存在于RNA聚合酶已转录过的序列中。转录终止指RNA聚合酶在DNA模板移动,直至遇到终止信号,停顿下来不再前进,转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。终止子结构特征:在转录终止点之前有一段回文结构,回文序列的两个重复部分(7-22bp)由一小段不重复区隔开,从而形成一个茎-环结构。原核生物两种转录终止模式:不依赖蛋白辅助因子(r因子)的终止模式依赖蛋白辅助因子(r因子)的终止模式不依赖r因子的终止子茎-环结构中G-C含量丰富,茎-环结构之后有一个poly(U)区。依赖r因子终止子茎-环结构中G-C含量低,茎-环结构之后没有特定特征。1)依赖r因子的终止r因子附着在新生RNA链,通过消耗ATP沿新生链5?3方向前行,至与RNA聚合酶结合当出现依赖r因子的转录终止信号时,r因子结合此特征结构,促使了“DNA-RNA-RNA聚合酶”三元复合物解聚,释放出新生RNA链,完成了转录过程ρ因子的作用原理:polyC01ρ因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白质,亚基分子量46kD。ρ因子能结合RNA,又以对polyC的结合力最强。ρ因子还有ATP酶活性和解螺旋酶(helicase)的活性。02转录终止不需要r因子的参加,当出现转录终止信号时(内在终止子),转录终止信号自身就可以使“DNA-RNA-RNA聚合酶”三元复合体解聚,释放出RNA新生链,完成转录过程。5′pppG5?3?3?5?RNA-pol5′pppGRNA-pol茎环结构使转录终止的机理:使RNA聚合酶变构,
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