T_NAIA 0339-2024 葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定 高效液相色谱-串联质谱法.docxVIP

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T/NAIA

团体标准

T/NAIA0339—2024

葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定高效液相色谱-串联质谱法

Determinationof5-HydroxymethylfurfuralinWinebyHPLC-MS/MS

2024-11-25发布2024-12-01实施

宁夏化学分析测试协会发布

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前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定编写。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全））、吐鲁番市质量与计量检测所、宁夏化学分析测试协会。

本文件主要起草人：朱燕燕、马桂娟、汤丽华、李强、张学玲、马利伟、宋钰、刘继辉、刘竞择、王鹏、高永梅、姚晓瑜、吕毅、吴明、张小飞。

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葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了葡萄酒中5-羟甲基糠醛的高效液相色谱-串联质谱检测方法。本文件适用于葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定和确证。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样经甲醇-水溶液（10+90，体积比）超声提取，经十八烷基硅烷键合硅胶分散固相萃取净化，液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂和材料

5.1.1甲醇：色谱纯。5.1.2甲酸：色谱纯。

5.1.3甲醇-水溶液（10+90，体积比）：量取100mL甲醇加入900mL水中，混匀。5.1.40.1%甲酸溶液：取甲酸1mL，用水溶解并稀释至1000mL。

5.1.50.1%甲酸甲醇溶液：取甲酸1mL，用甲醇定容到1000mL。5.1.6十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：粒径40μm～60μm。

5.1.7微孔滤膜（水相）：13mm×0.22μm，或相当者。

5.2标准品

5-羟甲基糠醛（纯度：≥99.0%，CAS：67-47-0）。

5.3标准溶液配制

5.3.1标准储备液：准确称取5-羟甲基糠醛标准品适量，用甲醇-水溶液（5.1.3）溶解并定容至

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10.0mL，配制成浓度为1.0mg/mL标准储备溶液，4℃以下避光保存，有效期3个月。

5.3.2基质匹配标准溶液：分别准确量取1.0μg/mL的标准储备液适量，用阴性葡萄酒基质定容至1.0mL，配制成5-羟甲基糠醛的浓度分别为10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、400.0、500.0ng/mL，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。6.2天平：感量0.1mg和0.01g。

6.3涡旋混合器。

6.4超声波发生器。

6.5离心机：转速不低于8000r/min。

6.6色谱柱：C18，2.1mm×100mm，粒径1.8μm或性能相当。

7分析步骤

7.1样品前处理

称取10g（精确至0.01g）葡萄酒样品于50mL具塞离心管中,加入15mL甲醇-水溶液（5.1.3），涡旋1min，超声20min，用甲醇-水溶液（5.1.3）定容至刻度，涡旋混匀，备用。移取5mL备用液，加入至装有100mgC18粉末（5.1.6）离心管中，涡旋2min，以6000r/min离心5min，吸取上清液过微孔滤膜（5.1.7），待测定。

7.2仪器参考条件

7.2.1液相色谱参考条件

a）柱温：25℃。

b）流动相：A：0.1%甲酸溶液（5.1.4），B：0.1%甲酸甲醇溶液（5.1.5）；梯度洗脱见表1。

c）流速：0.3mL/min。

d）进样量：5μL。

表1流动相及梯度洗脱条件

时间/min

流速/（mL/min）

流动相A/%

流动相B/%

0.00

0.3

95

5

1.50

0.3

95

5

3.00

0.3

65

35

5.00

0.3

5

95

7.00

0.3

5