DB32T 3628-2019 木霉固态菌种生产技术规程　.docxVIP

ICS65.080B13

备案号：DB32

江苏省地方标准

DB32/T3628—2019

木霉固态菌种生产技术规程

TechnicalregulationforproductionofsolidTrichodermaspp.spawn

2019-07-11发布2019-08-01实施

江苏省市场监督管理局发布

DB32/T3628—2019

I

前言

本标准按GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由南京农业大学提出并归口。本标准起草单位：南京农业大学。

本标准主要起草人：沈其荣、刘东阳、黄启为、李荣、凌宁。

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木霉固态菌种生产技术规程

1范围

本标准规定了木霉固态菌种生产中所涉及的生产场地要求、生产流程、产品检测、建立生产档案、包装及贮存运输要求等技术环节。

本标准适用于木霉固态菌种的生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T191包装储运图示标志GB3095环境空气质量标准

GB3838地表水环境质量标准GB20287农用微生物菌剂

NY/T883农用微生物菌剂生产技术规程

3术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

固态菌种solidspawn

生长在固态培养基料上的菌种。3.2

微生物接种剂microbialinoculant

一种或一种以上的目的微生物经工业化生产增殖后直接使用，或经浓缩或经载体吸附而成的活菌制品。

3.3

固体培养基solidmedium

以富含木质纤维素或淀粉类天然物质为主要原料，添加适量的有机氮源及无机盐类，具一定水分含量的培养基。

4生产场地要求

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4.1生产基地选择

生产基地应远离居住区、城区等，并且交通便利，生态环境优良，周边植被覆盖率高。生产地块集中连片并位于原料收集区较近的地方。车间保温保湿性能良好，同时具备通风性能。

4.2生产环境

厂区空气质量达到大气环境质量标准GB3095中II类标准要求。

发酵用水达到地表水质量标准GB3838中III类水质要求，冷却水及其他用水应达到标准IV类水质要求。

4.3生产车间

4.3.1原料库

原料库要求水电方便，平坦干燥、通风良好，光照充足、空旷宽阔，远离火源，注意防火设施的建设。

4.3.2接种室

接种室必须设缓冲间，通风和保温性能良好，并具有防尘换气性能，墙内壁和屋顶光滑，必须做好杀菌消毒工作，确保接种室环境的相对无菌。

4.3.3培养室

培养室内壁和屋顶光滑，便于清洗与消毒，有条件的单位可以建设半地下室的培养室，或者将培养室墙壁加厚，有利于培养室的控温。

4.3.4检验室

检验室宜留出便于检验仪器设备安装的场所，同时水电布局要求合理，建立车间环境卫生制度，定期对生产设备和环境消毒的。

5生产流程

5.1技术环节

木霉固态菌种主要包括木霉高密度液体发酵、固体基质准备、接种木霉液体菌种、固体发酵的控制、固态菌种后处理、产品包装、质量检测及出厂等技术环节。具体工艺流程见附录A。

5.2菌种要求

5.2.1原种

原种是生产用菌种的母种，对原种有如下要求：——原种应有菌种鉴定报告。

——原种应有菌种的企业编号、来源信息等。

5.2.2菌种保管

采用固体曲保藏和冻干管保藏的方法保藏木霉固体孢子，确保无杂菌污染，菌种不退化。分类纯化并定期检查，建立菌种档案。

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5.2.3菌种质量控制

在进行生产之前，应对所使用的菌种进行检查，并确认其纯度和性能没有发生退化，如出现污染或者退化情况，该菌种不能作为生产用菌种，应该按照标准NY/T883执行。

5.3液体发酵增殖

木霉菌种的液体发酵增殖，按照NY/T883执行。具体的培养基见附录B。

木霉菌丝体采用棉兰染色法观察：在载玻片中央滴加一滴无菌水，并将菌丝体均匀分布其中，盖上盖玻片，尽量不留气泡，从一侧滴加少量的棉兰染色液染色5min，染色结束后用无菌水慢慢冲洗染色液，表面风干后在显微镜下观察，染色液配方具体见附录C。菌丝清晰可见，生长良好，没有出现杂菌污染，可以作为菌种继