DB32T 3762.14-2021 新型冠状病毒检测技术规范 第14部分：N亚基因组荧光PCR检测程序　　.docxVIP

ICS11.020

C62DB32

江苏省地方标准

DB32/T3762.14—2021

新型冠状病毒检测技术规范

第14部分：N亚基因组荧光PCR检测程序

TechnicalspecificationsforSARS-CoV-2detection

Part14:Real-timefluorescencePCRtestNsubgenomicRNAprocedure

2021-12-09发布2022-01-09实施

江苏省市场监督管理局发布

DB32/T3762.14—2021

I

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4环境与设施 1

5设备与耗材 1

6试剂与材料 1

7样本前处理与核酸提取 2

8扩增体系配制与扩增 2

9结果判定 2

10附录A 3

DB32/T3762.14—2021

II

前言

DB32/T3762《新型冠状病毒检测技术规范》目前分为以下部分：——第1部分：生物样本采集、运输和保存；

——第2部分：病毒分离与鉴定；

——第3部分：核酸荧光PCR检测程序；

——第4部分：重组酶介导等温扩增程序；

——第5部分：血清IgM和IgG抗体酶联免疫吸附检测程序；

——第6部分：血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序；

——第7部分：空气样本检测与评估；——第8部分：物体表面检测与评估；

——第9部分：医务人员职业暴露检测与评估。

——第10部分：微量血清中和试验；

——第11部分：全基因组高通量测序；

——第12部分：药物体外抗病毒效果测定；

——第13部分：叠氮溴化丙锭-荧光PCR检测程序；——第14部分：N亚基因组荧光PCR检测程序；

——第15部分：血清/血浆IgM和IgG抗体磁微粒化学发光法检测程序；——第16部分：核酸数字PCR法；

——第17部分：核酸检测用假病毒阳性质控品；——第18部分：规模化核酸检测程序。

本文件为DB32/T3762的第14部分。

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由江苏省卫生健康委员会提出。

本文件由江苏省卫生标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：江苏省疾病预防控制中心、无锡市疾病预防控制中心、镇江市疾病预防控制中心、常州市疾病预防控制中心。

本文件主要起草人：朱小娟、崔仑标、朱宝立、葛以跃、吴涛、吴斌、赵康辰、乔乔、陈银、肖勇、徐虹、王凤鸣。

DB32/T3762.14—2021

1

新型冠状病毒检测技术规范第14部分：N亚基因组荧光PCR检测程序

1范围

本文件规定了新型冠状病毒N亚基因组荧光PCR检测环境与设施、设备与耗材、试剂与材料、样本前处理与核酸提取、扩增体系配制与扩增、结果判定。

本文件适用于新型冠状病毒N亚基因组荧光PCR检测，为判断样本中的新型冠状病毒是否具有感染性提供辅助手段。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版）适用于本文件。

DB32/T3762.3新型冠状病毒检测技术规范第3部分：核酸荧光PCR检测程序

3术语和定义

3.1

亚基因组RNAsubgenomicRNA，SgRNA

在结构上由病毒5’UTR区Leader序列及各基因转录RNA片段构成，亚基因组的出现可反应病毒复制状态，从而代表病毒的感染性。

4环境与设施

同DB32/T3762.3的4.1条和4.2条。

5设备与耗材

同DB32/T3762.3的5.1条和5.2条。

6试剂与材料

6.1试剂

6.1.1病毒核酸提取试剂盒。

6.1.2实时荧光PCR检测试剂。

6.2引物与探针

DB32/T3762.14—2021

2

新型冠状病毒N亚基因组的荧光定量PCR引物、探针组合物（序列见附录A），其中探针的5’端标记的是FAM荧光报告基团，3’端标记的是BHQ1荧光淬灭基团