遗传病的诊断和治疗.pptVIP

PCRSSCP：SingleStrandConformationPolymorphismsGenePCRDenatureQuickcoolNon-denaturinggel.Slowrun.Cool.PCRDGGE：DenaturingGradientGelPolymorphismsPCR/Southernblot联合应用检测三核苷酸重复相关遗传病：DNA测序法：DNA测序（DNASequencing)是检测未知突变和已知突变基因的最基本和最重要的实验手段。又称DNA芯片，（DNAarray）.指把成千上万个寡核苷酸或cDNA探针密集、规律地排列在1cm2大小的硅片或玻璃芯片上，容量可达20～40万个基因探针。将荧光标记的DNA或cDNA样品送到在芯片上与探针杂交，经激光共聚焦显微镜扫描，以计算机系统对荧光信号做出比较和检测，可迅速得出所需的信息，比常规方法快几十到几千倍。基因芯片DNAmicroarraysonglassslides表达谱芯片和寡核苷酸芯片芯片探针样本形式应用范围表达谱芯片长片段PCR产物mRNA或cDNA基因表达分析；新药开发，毒副作用分析寡核苷酸芯片短单链DNADNA片段遗传病检测；多态性位点检测；肿瘤诊断表达谱芯片工作原理：Cy5/Cy3的比率（0.5-2.0)。提取RNACy3标记对照组，Cy5标记实验组。混合两种探针，与芯片杂交扫描仪以两种波长激光扫描，532nm探测Cy3，633nm探测Cy5。Red：明显上调；green：明显下调，yellow：差异不显著。0304050601020102由于DNA链短（20-30nt），单个碱基错配可以降低杂交链的稳定性，Tm值降低5-10控制杂交条件：时间、温度、盐浓度等，可以使完全匹配和单碱基错配的双链杂交几率明显不同。提取基因组DNA，PCR扩增并用荧光标记，与芯片杂交，可以判断待测样品同芯片上哪个片段结合，可知待测DNA序列上特定位点的碱基特征。℃寡核苷酸芯片工作原理：病诊断??????????*药物筛选鉴定基因芯片是生物芯片研究中，最先实现商品化的产品。新基因????????*DNA测序检测和防治??*食品卫生监督基因组学??????*农作物优育和优选020304050601基因芯片应用基因诊断是基因芯片中最具有商业化价值的应用从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱。从病人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出病变图谱。通过比较、分析这两种图谱，就可以得出病变的DNA信息。这种基因芯片诊断技术以其快速、高效、敏感、经济、平行化、自动化等特点，将成为一项现代化诊断新技术。21Affymetrix公司，把P53基因全长序列和已知突变的探针集成在芯片上，制成P53基因芯片，将在癌症早期诊断中发挥作用。现在，肝炎病毒检测诊断芯片、结核杆菌耐药性检测芯片、多种恶性肿瘤相关病毒基因芯片等一系列诊断芯片逐步开始进入市场。Heller等构建了96个基因的CDNA微阵，用于检测分析风湿性关节炎(RA)相关的基因，以探讨DNA芯片在感染性疾病诊断方面的应用。3应用实例3241由G6PD基因的突变、插入和缺失引起。操作时间短（4小时以内），适于大批量检定。根据已知的基因突变型可设计突变基因探针，制成芯片可同时检测中国人种的8种突变类型，覆盖率达90%以上，并能精确确定突变类型及纯、杂合状况。G6PD缺乏症检测芯片HLA分型01地中海贫血检测02乙肝耐药性检测03基因芯片的其他临床应用：针对一些发病较迟的常染色体显性遗传病患者在出现症状或生育前对其作出诊断。01基因诊断是症状前诊断的主要手段。02症状前诊断产前诊断是对胚胎或胎儿是否患有遗传病或先天畸形在出生前进行的诊断215第二十条孕妇有下列情形之一的，医师应当对其进行产前诊断：多或者过少的；病家族史或者曾经分娩过先天性严重缺陷婴儿的；4接触过可能导致胎儿先天缺陷的物质的；3育异常或者胎儿有可疑畸形的；6年龄超过35周岁的。母婴保健法规定：产前诊断的方法非侵袭方法母亲血清、尿液的生化检查B超侵袭性方法：根据妊娠时间及检测目的有针对性地选用不同的穿刺取样技术，然后将样品进行实验室检查（细胞遗传学、生化检查、基因诊断）。羊膜穿刺术、绒毛吸取术、脐带穿刺术01脐带穿刺术孕18周脐带血细胞取样方法取样时间