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腺病毒转染siMDM2和NDRG2基因疗法对SCC-13的增殖和

凋亡的影响和机制的开题报告

一、研究背景

鳞状细胞癌（squamouscellcarcinoma，SCC）是一种常见的皮

肤肿瘤，也是口腔、喉咙、食管、肺、宫颈等部位的常见恶性

肿瘤之一。目前，治疗SCC的主要手段是手术切除、放疗和

化疗等传统疗法。然而，这些疗法的效果并不理想，尤其是治

疗晚期的患者时常会遇到药物耐受性和复发等问题，因此急需

寻找新的治疗方法。

siRNA基因干涉技术是近年来发展起来的一种新型基因治疗方

法，它通过设计合成相应的小干扰RNA（siRNA），靶向

ssDNA或ssRNA上的特定序列，从而使基因表达受到抑制。

Mdm2和NDRG2是肿瘤发生和发展过程中起关键作用的基因，

它们的异常表达会对细胞增殖、凋亡、DNA修复等重要生物

学过程产生影响。因此，本研究将使用腺病毒作为siRNA携

带体，将siMDM2和siNDRG2基因转染到SCC-13细胞中，

探索其对SCC-13细胞增殖和凋亡的影响，并探讨其作用机制。

二、研究目的

1.研究siMDM2和siNDRG2基因转染后对SCC-13生长抑制

和细胞凋亡的影响；

2.探究siMDM2和siNDRG2基因转染后对SCC-13细胞周期、

细胞周期调控蛋白的表达和细胞凋亡信号通路的影响；

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3.为基于siRNA的肿瘤基因治疗提供实验依据和理论基础。

三、研究内容

1.细胞培养和处理：通过采用化学法和酶解法体外提取SCC-

13细胞，然后在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中进行培

养。待细胞生长稳定后，根据实验设计将细胞分别处理为实验

组和对照组。

2.转染siRNA和腺病毒：将siMDM2、siNDRG2和空白质粒

克隆到适当的载体中，制备腺病毒载体。待病毒质粒成功构建

后，根据实验方案进行适当稀释和转染，进而使siRNA和腺

病毒成功转染到细胞中。

3.实验数据分析：采用MTT测定法检测细胞的增殖活性、流

式细胞术检测细胞周期的变化和细胞凋亡率的变化、Western

blot分析检测肿瘤相关蛋白的表达变化，并根据实验结果进行

数据统计和分析。

四、研究意义

该研究将探索siMDM2和siNDRG2基因转染对SCC-13细胞

增殖和凋亡的影响，为开发肿瘤基因治疗提供理论和实验基础。

此外，本研究还将探讨siRNA技术的可行性和安全性，为今

后深入开展siRNA基因干涉技术的研究提供有益参考。

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