转录和转录后加工.pptVIP

5’pppXpY---------------------(30Nt)-3’(pre--mRNA)pippXpY-----mRNA加帽过程GTPSAMpp5’XpYp-----------G5’ppp5’XpYp----------------RNA鸟苷酰转移酶RNA（鸟嘌呤－7）甲基转移酶SAHppiG5’pm7-(withCap-0)RNA三磷酸酶SAMSAMm7G5’ppp5’XmpYp---------------m7G5’ppp5’XmpYmp---------------SAM;S-Adenosyl-L-methionineSAH;S-Adenosyl-L-homocysteineRNA核苷-2’-O-甲基转移酶RNA核苷-2’-O-甲基转移酶G5’ppp5’XpYp----------------m7SAH(withCap-1)SAH(withCap-2)翻译过程中起识别作用；01稳定mRNA，保护其免受5’端核酸外切酶的降解02帽子的功能（2)3’末端的切割和多聚腺苷酸化5’-AAUAAA-3’聚腺苷酸化信号序列、其后11-20nt紧随5’-YA-3’结构（Y-嘧啶）、下游有GUrich序列，这些序列共同决定了聚腺苷酸化位点hnRNA的多聚腺苷酸平均长度为150~200nt。加尾反应需要在mRNA转录产物上有特定的序列真核生物mRNA的3’端常有20~200个腺苷酸残基AAUAAA是切割产生3’端和多聚腺苷酸化所必需的。Summaryofdataon369vertebratepolyadenylationsignals.加尾过程特定的蛋白因子识别信号序列后，结合前体mRNA上，组装成复合体01内切酶CF(cleavagefactor)在AAUAAA下游11～20nt的特定位点对前体mRNA进行剪切;02聚腺苷酸聚合酶PAP在3’端添加多至250个A残基03PABP结合到poly(A)04CF：剪接因子CPSF:剪接多腺苷酸化专一因子PAP:多聚腺苷酸聚合酶PABP:多聚腺苷酸结合蛋白加尾的作用抵抗3’核酸外切酶攻击，增强mRNA稳定性有助于翻译真核生物mRNA的3’端polyA结构可用于oligo(dT)对mRNA的反转录出cDNA;也可用于纯化mRNA的制备。（3）pre-mRNA剪接①5’端有5’-GU-3’序列；②3’端有5’-AG-3’序列；③3’端AG序列前有富含嘧啶区④嘧啶区上游10-40nt有分支点序列区GU-AG规则内含子的特点GT-AG位点决定了内含子边界，其改变或缺失突变将影响正确剪接3’splicesites5’splicesites真核细胞mRNA分子内部主要的碱基化甲基是m6A，这类修饰成分在hnRNA中已经存在。mRNA分子内部的甲基化在剪接之前由特异甲基化酶催化产生。这类修饰成分在mRNA前体的加工过程中，起着被特异分子识别的作用mRNA的内部甲基化010201RNA的剪接、编辑和再编码RNA剪接：1.1定义：把内含子从RNA前体中剪掉，连接外显子组成成熟RNA的过程叫RNA的剪接。12I型自我剪接(groupIself-splicing)II型自我剪接(groupIIself-splicing)核mRNA的剪接体剪接(nuclearmRNAsplicesomalsplicing)核tRNA的酶促剪接(nucleartRNAenzymaticsplicing)选择性剪接（alternativesplicing）反式剪接（cis-splicing）、RNA的剪接的类型A、I型自我剪接剪接的机制是转酯反应（磷酸酯的转移反应）第一次转酯，G的3’-OH攻击内含子的5’端第二次转移，外显子A的3’-OH攻击外显子B的5’端第三次转移，内含子的3’-OH攻击5’端的第15个碱基处的键12logo被外切的内含子可利用其内部两端的位点与5’端进行反应而环化，环化内含子也可在水或其它寡核苷酸作用下重新打开。（２）RNA催化使用两个位点：G结合位点和一个底物结合位点四膜虫rRNAI型内含子的外切过程包含从占据鸟嘌呤核苷结合位点到占据底物结合位点之间的一系列连续反应。左边外显子用红色表示，右边外显子用紫色表示。催化的RNA有一个G结合位点和一个底物结合位点第二次转移，G414在G结合位点中，5’端外显子占据底物结合位点中第