遗传病的治疗.pptVIP

病毒介导转移法(viralmediatedgenetransfer)01是通过转换方式完成基因转移，即以病毒为载体，将外源目的基因通过基因重组技术，组装于病毒上，让这种重组病毒去感染受体宿主细胞，这种病毒称为病毒运载体（viralvector）。目前有两类病毒可以作为载体：020102反转录病毒（retrovirus）反转录病毒虽是RNA病毒，但有反转录酶，可使RNA转录为DNA,再整合到细胞基因组。逆转录病毒具有以下三个优点：首先是它具有穿透细胞的能力，其转染率可达100%；其次是宿主范围广，可同时感染大量细胞并长期停留。DNA病毒（DNAvirus）DNA病毒包括腺病毒、SV40病毒、牛乳头瘤病毒、疱疹病毒等。其中腺病毒是近年来倍受关注的DNA病毒，因为它具有插入DNA较长，不需要正在分裂的靶细胞，可以原位感染和病毒滴度高等优点，此外，由于腺病毒载体一般不会整合到宿主的基因组中，从而大大减少了插入突变的危险。靶细胞的选择转基因治疗中的靶细胞选用应该是在体内能保持相当长的寿命或者具有分裂能力的细胞，这样才能使被转入的基因能有效地、长期地发挥“治疗”作用。因此干细胞、前体细胞都是理想的转基因治疗靶细胞。以目前的观点看，骨髓细胞是惟一满足以上标准的靶细胞，而骨髓的抽取、体外培养、再植入等所涉及的技术都已成熟；另一方面，骨髓细胞还构成了许多组织细胞（如单核巨噬细胞）的前体，除了骨髓以外，肝细胞、神经细胞、内皮细胞、肌细胞也可作为靶细胞来研究或实施转基因治疗。反义寡核苷酸技术一些遗传病和肿瘤往往是基因突变或过量表达而产生异常的蛋白质所致，如果应用DNA和RNA的碱基互补，可形成同源和异源双链的原理将这些突变基因转录的mRNA(DNA)阻断在翻译（或转录）前，使症状得到改善。即人为的制成反义核酸，使其和mRNA互补结合，阻止其翻译成蛋白质而达到治疗疾病的目的。三链形成寡核苷酸(triplex-formingoligonucleotides,TFO)三链形成寡核苷酸是指一段DNA或RNA寡核苷酸在DNA大沟中以、Hoogsteen氢键与DNA高嘌呤区结合，形成三链结构。TFO可与启动子区或结构基因结合而抑制基因转录。这项策略要求DNA靶位点附近的嘌呤含量丰富，因而限制了该项技术的广泛应用。核酶（ribozyme）与核酶介导的反式剪接1核酶是由RNA构成的具有催化功能的酶，可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂，在肿瘤和HIV感染的基因治疗中有广泛的应用。2RNA干扰（RNAinterference）01RNA干扰现象于1998年发现。Fire和Mello等发现RNA的意义链和反义链均可抑制基因的表达，设想二者在抑制基因的表达中可能有累加的功能。研究表明，意义链和反义链RNA共存抑制基因表达的效率达到单一意义链或反义链RNA的10倍以上，这种双链RNA（dsRNA）介导的转录后基因沉墨(PTGS)现象称为RNA干扰，简称为RNAi。02“自杀基因”疗法这类治疗方案的原理是将编码某种酶的基因（自杀基因）转染到肿瘤细胞中，然后用药物来杀死细胞。这种药物对正常细胞无毒，但对肿瘤细胞具有选择性杀伤作用，因为导入的“自杀基因”所编码的酶使这种药物转化为对肿瘤有害的物质，使肿瘤细胞DNA不能复制而死亡。多抗药基因疗法由于多抗药性（MDR）基因已被克隆，因此人们设想分离患者的造血干细胞，将MDR基因从体外转导进去，使这种干细胞获得多药耐药性，再回输给患者，使得由此类被修饰的干细胞繁衍的白细胞具有多药耐药性，而肿瘤细胞未获得MDR基因，不具备耐药性或耐药性较差，这样在加大化疗剂量或在持续较长时间化疗的情况下，可大量杀死肿瘤细胞而白细胞较少受损，以此达到治疗肿瘤的目的。抑癌基因疗法野生型抑癌基因的失活和肿瘤的发生密切相关，因此人们设想将正常的野生型抑癌基因导入肿瘤细胞以代替和补偿有缺陷的抑癌基因，从而抑制肿瘤的生长或逆转其表型。这是基因添加的一种方式。这方面研究最多的是P53基因。编码抑制抑制野生型p53基因→P53蛋白→P21蛋白→CDK2+cyclinA、E→G1→Sp53基因影响细胞分裂的机制示意图迄今为止，只有20种遗传病被列为基因治疗的主要对象，其中部分疾病研究已进入了临床试验阶段。基因治疗的临床应用第十四章

遗传病的治疗随着医学遗传学和分子遗传学的飞速发展使医学临床诊断和临床检测技术迅速提高，人们对人类遗传病的研究已经取得了许多重要成果。特别是重组DNA技术在医学中的广泛应用，遗传病的治疗有了突破性的进展，已从传统的手术治疗，饮食疗法，药物疗法等跨入了基