生物学特点培养细胞的细胞生物学.pptx

生物学特点;体外培养物的细胞生物学特点

;体外培养物的细胞生物学特点;1.培养的细胞之间

仍有在形态和机能上的相互依存关系。

在结构上，如：

上皮细胞仍见有桥粒

在生理活动上，

单个细胞虽能生长繁殖,

但不如群体细胞能力强，

当相邻细胞接触，便导致运动停止

细胞相互沟通生物信息的结果

2.培养的细胞和基质之间

对细胞外基质仍有依存性;但有不同

人工所模拟的条件与体内实际情况

仍不完全相同

当细胞被置于体外培养后

久了,必然发生变化

与体内主要不同

相对孤立、相对单一

缺乏体内的一些影响;主要表现

失去原有组织结构和细胞形态

如：肌肉细胞—纤维化

分化减弱或不显

出现类似“返祖”现象：细胞趋向单一化

或获得不死性

或变成具有恶性性状的细胞群

因此要正确认识体外培养细胞

是一种特定条件下生长的细胞群体

;培养细胞的主要的生物学特点;去分化;体外培养物的细胞生物学特点;培养细胞分化状态的变化;去分化(脱分化):

各种分化细胞，逐渐失去各自的形态与功能“个性”，表现出某种趋同性

如:

培养的成纤维细胞

在适当刺激下，可分化为

其它结缔组织细胞和肌组织细胞，

表现出类似未分化的间充质细胞的特性，‘返祖’

有2点

;1.但,去分化并不意味着完全返回胚胎时期的原始细胞状态

如:高度分化的神经细胞和心肌细胞

已经丧失的增生活性不可能恢复

但已经具备的生物电活动特性

不会完全失去;2.可重新表现出分化特点如：

把表皮细胞放在气液界面上培养，可分化成

含大量角蛋白丝的角质细胞

内皮细胞--

但，这种能力会随着培养时间延长

逐渐丧失

总之，休外培养,使细胞

结构与功能上的“可塑性”增大

防止去分化;贴附和铺展

;贴附(粘附)和附着;不同细胞的粘附能力不同

如巨噬细胞、成纤维细胞等粘附能力强

能在数分钟至数十分钟内粘附到固相表面

如神经元细胞、羊水细胞，粘附能力弱

需要数小时乃至更长的时间才能粘附到固相表面

粘附能力强的细胞---

粘附能力弱的细胞---

可利用此特点（粘附：快、牢；慢、弱）

分离、纯化细胞;细胞形态

因是否贴附于底物而不同

悬浮的细胞:

基本圆形

粘附和贴壁的细胞:

扁平圆形

相差显微镜

“亮圈”

很快过渡--;贴附过程：3步

贴附因子粘附

细胞开始附着

细胞进一步

牢固附着—伸展

;影响因素

各种细胞不同如接种30’后…第二瓶30’…

(附着最强)巨噬细胞一成纤维细胞

——上皮细胞——血细胞(最弱)

生物因素

血清、培养液中的促附着因子

机械，物理等其他因素因素

离心：促进附着

流动：培养液流动可阻止细胞附着

低温：可抑制附着

;措施（因素）

1.包被

对分化程度高、生长能力差的细胞

可在培养瓶皿表面包被有利于细胞粘附和

生长的生物活性物质如:--

通过其所带电荷先吸附--,培养的细胞再与其结合。

血清内含有多种能够

促进细胞粘附的成分

细胞本身也可能产生一些粘附分子;措施

2.减少接种时细胞悬液的量

待细胞粘附和贴壁之后，再补充足够的培养液

3.减少培养液中血清的含量

使培养液黏度降低

4.培养液中离子成分及其浓度

如，培养液中的Ca含量过低时不利于

细胞的粘附、贴壁和铺展

5.培养液的温度

低温会减低细胞的活动，妨碍黏附和贴壁;促进细胞粘附的成分;;铺展;铺展状况

是调节细胞形状的主要方面

铺展得越好，细胞越扁

意味着细胞与生长基质表面接触面越大

铺展状况

与细胞的生长有密切关系

只有当细胞铺展到合适的程度

DNA合成才开始进行

通